Identificação de marcadores de competência envolvidos no ciclo celular de oócitos caninos pela análise proteômica

Resumo

Nos mamíferos, os oócitos ao serem removidos do ambiente folicular, deixam de ter o sinal que mantém o bloqueio meiótico e reiniciam a meiose. Nas cadelas, embora o oócito possa retomar espontaneamente a meiose in vitro, as taxas de maturação são muito baixas e a porcentagem de oócitos que permanecem em VG é alta. Vários estudos têm buscado a compreensão da regulação do ciclo celular em oócitos de mamíferos, especialmente a regulação de uma série de proteínas fosfatases e quinases que controlam a meiose, para elucidar o que mantém a meiose bloqueada. Desta forma, este projeto tem como objetivo consolidar e ampliar o estudo experimental e aplicado, com ênfase no controle do ciclo celular de oócitos caninos e sua associação com a competência oocitária nesta espécie animal, por meio de técnicas moleculares refinadas que identifiquem a expressão de seus biomarcadores alvo. Os ovários serão coletados de cadelas consideradas hígidas ao exame clínico e submetidas à ováriosalpingohisterectomia (OSH) eletiva. Os oócitos serão selecionados para a maturação in vitro (MIV) e avaliados nos tempos 0h, 24h, 48h e 72h. A técnica da proteômica será utilizada para identificar e quantificar a expressão das proteínas envolvidas no controle do ciclo celular e a técnica da Imunofluorescência para avaliar a localização destas proteínas durante os diferentes estágios da MIV. (AU)