Estudo da ação do papilomavírus bovino (BPV) na transição epitélio-mesênquima

Resumo

O papilomavírus bovino (BPV) é o agente etiológico da papilomatose bovina, doença infectocontagiosa caracterizada pela presença de papilomas que regridem espontaneamente, mas que podem persistir e progredir à malignidade. O vírus é considerado o melhor modelo na compreensão do processo oncogênico do HPV. Estudos sugerem que o papilomavírus induz a transição epitélio-mesênquima (TEM), caracterizada por alterações a nível morfológico e transcripcional, conferindo perda da adesão e ganho de motilidade celular. Embora a associação entre papilomas e câncer seja conhecida há mais de 60 anos, os mecanismos de transformação maligna, invasão e metástase permanecem desconhecidos. Este trabalho tem por objetivo avaliar o papel do BPV na TEM tanto em amostras de cultura de células, como de tecido de papiloma cutâneo e carcinoma esofágico. Células de papilomas cutâneos, carcinoma de esôfago e pele normal (controle) serão cultivadas até a passagem seis, avaliando-se o ciclo celular por FACScan e os níveis de clastogenicidade pelo ensaio cometa. O diagnóstico molecular do BPV será realizado através de PCR e sequenciamento. A expressão de diferentes marcadores de TEM, bem como a produção de espécies reativas de oxigênio serão avaliadas por FACScan e imunofluorescência. Os ensaios de migração e invasão serão empregados para avaliar a motilidade celular. Amostras dos respectivos tecidos que originaram as linhagens celulares serão submetidas à análise histopatológica e imunoistoquímica, empregando os mesmos marcadores de TEM avaliados in vitro. (AU)