O papel do AMH na diferenciação sexual e na gametogênese de peixes teleósteos

Resumo

A decisão se o primórdio gonadal bipotencial irá se desenvolver em um testículo ou um ovário é uma etapa crítica na determinação sexual dos vertebrados. Este processo consiste em uma complexa cascata gênica que culmina na diferenciação das células somáticas presentes na gônada bipotencial. Neste contexto, o Amh (hormônio anti-Mülleriano) é um importante efetor nesta decisão. Estudos com o peixe medaka hotei, no qual o receptor II do Amh (Amhr2) é mutado, mostram elevado índice gonadossomático, e reversão sexual de macho para fêmea. Com base nestas informações, postula-se que o Amh regule o número de células germinativas, e diretamente ou indiretamente este fato pode influenciar na decisão da gônada bipotencial em se tornar testículo ou ovário. Além disso, o Amh deve desempenhar um papel na gametogênese por regular a expressão diferencial de genes importantes para função gonadal. Sendo assim, o objetivo do presente projeto é avaliar a sinalização do Amh durante a diferenciação sexual e gametogênese em dois modelos experimentais, o peixe medaka (Oryzias latipes) e zebrafish (Danio rerio). Para tanto, estudos de perda-e-ganho de função gênica serão empregados; linhagens transgênicas que superexpressem, ou que tenham deficiência de amh/amhr2 serão gerados para o peixe medaka. A caracterização genotípica (para o cromossomo Y) e a histologia gonadal serão avaliadas para determinar possível reversão sexual nestas linhagens. Além disso, o número de células germinativas, taxa de proliferação celular, e liberação de andrógenos serão determinados para melhor compreender a sinalização do Amh na gametogênese. Por fim, o zebrafish será utilizado para analisar os genes diferencialmente regulados pelo Amh, e conseqüentemente seus mecanismos de ação. Para tanto, transcriptoma dos testículos de zebrafish incubados com Amh será realizado. Os potenciais candidatos do seqüenciamento serão validados através de qPCR e/ou hibridização in situ. Os resultados deste projeto fornecerão subsídios para compreender o papel do Amh na diferenciação sexual, bem como na gametogênese de peixes teleósteos. Estes dados poderão servir como uma potencial ferramenta biotecnológica para a aquicultura comercial, como por exemplo, para mediar à puberdade em algumas espécies bem como também masculinizar outras. (AU)