Híbridos Chalcona-Inibidor de Histona-Desacetilase como Agentes Citotóxicos e Bloqueadores da Via Wnt/beta-catenina: Síntese e Avaliação em Células de Mama e Zebrafish

Resumo

Os agentes antineoplásicos são fármacos essenciais à manutenção da expectativa de vida. Inúmeras razões justificam a necessidade por novos antitumorais, incluindo as elevadas taxas de morbidade e mortalidade ocasionadas pelo câncer. Dessa forma, esforços são prementes para desenvolver agentes antitumorais inovadores. O presente projeto propõe a síntese de duas séries de híbridos moleculares simbióticos, os quais foram planejados para atuarem por três modos de ação; inibição de histona-desacetilase (HDAC), bloqueio da via Wnt/beta-catenina e inibição da expressão de receptores de estrógeno alfa (ERalfa). Estruturalmente, essas substâncias internalizarão duas subunidades; chalcônica e de inibidores de HDAC, sendo as séries I e II compostas por híbridos chalcona-hidroxamato e chalcona-benzamida, respectivamente. A rota sintética será realizada em quatro etapas, incluindo duas divergentes, as quais permitirão a obtenção simultânea das séries I e II. As substâncias serão avaliadas por ensaios de citotoxicidade, empregando linhagens de mama tumorigênicas (MCF-7 e MDA-MB-231) e não-tumorigênica (MCF-10A). Os valores de concentração capaz de matar 50% das células (CI50) serão estabelecidos para as três linhagens, os quais serão comparados aos obtidos para o vorinostato (SAHA), um inibidor de HDAC em uso clínico. O índice de seletividade das substâncias (IS) será calculado a partir dos valores de CI50, sendo IS = CI50 (não-tumorigênica)/CI50 (tumorigênica). As substâncias que apresentarem valores de CI50 iguais ou inferiores ao SAHA serão submetidas aos ensaios de inibição da acetilação das histonas H1, H3 e H4, da expressão de HDAC de classe I e II, bem como de ER±, utilizando homogenatos de MCF-7 e análises por Western Blot. A ação bloqueadora sobre a via Wnt/beta-catenina será avaliada por meio de ensaios utilizando embriões de zebrafish (Danio rerio) expostos a 6-bromoindirubina-3'-oxima (BIO), um inibidor de glicogênio-sintase-cinase-3 (GSK). BIO é uma substância que superativa a via Wnt/beta-catenina, conduzindo a má ou não-formação de olhos durante o desenvolvimento embrionário. Assim sendo, as substâncias bloqueadoras da via Wnt/²-catenina reestabelecerão a formação de olhos nos embriões.