Análise comparativa e integrativa do transcriptoma e microRNAoma do músculo esquelético de Colossoma macropomum (tambaqui), Piaractus mesopotamicus (pacu) e seu híbrido, tambacu: abordagens moleculares, in silico, in vitro e in vivo.

Resumo

As espécies Colossoma macropomum (tambaqui) e Piaractus mesopotamicus (pacu) possuem grande aceitação no mercado, especialmente por apresentarem características desejáveis para o ambiente de produção. Embora estas espécies apresentem grande semelhança em termos de hábito alimentar, há grandes variações em termos de melhor adaptação à temperatura de cultivo e taxa de crescimento. O tambaqui apresenta uma maior taxa de crescimento quando comparado ao pacu que por sua vez, apresenta uma maior adaptação a temperaturas mais baixas. No entanto, considerando os indivíduos originados à partir da hibridização entre estas duas espécies, o tambacu, apresenta características que se sobrepõem às observadas em seus parentais, sendo por essa razão, muitas vezes o mais indicado para o ambiente de cultivo. Apesar da comprovada importância do pacu, tambaqui e tambacu para a aquicultura brasileira, as informações genéticas para estes genótipos são extremamente escassas nos bancos de dados especializados. Neste sentido, pretende-se caracterizar o transcriptoma (RNAs mensageiros transcritos) e o microRNAoma do músculo branco dos três genótipos estudados. Em seguida, será realizada uma análise integrativa e comparativa do transcriptoma e microRNAoma dos três genótipos tendo como objetivos específicos: (i) Identificar o perfil de expressão diferencial das sequências transcritas e de microRNAs em cada genótipo parental (pacu e tambaqui) em relação ao híbrido (tambacu); (ii) avaliar o grau de similaridade das sequências nucleotídicas entre os três genótipos; (iii) realizar a predição de vias de sinalização e construção de redes de interação microRNA-mRNA envolvidas com as vias de controle do desenvolvimento, crescimento e manutenção do fenótipo muscular dos três genótipos; (iv) identificar possíveis biomarcadores ou alvos genéticos relacionados com o vigor híbrido apresentado pelo tambacu; (v) avaliar a expressão dos principais transcritos e dos microRNAs através de RTqPCR, e dos marcadores identificados após a comparação entre os três genótipos; (vi) estabelecer a cultura primária de mioblastos em tambaqui e tambacu e (vii) corroborar dados obtidos com a identificação do perfil de expressão diferencial, predição de vias de sinalização e redes de interação microRNA-mRNA (análise in silico), entre os três genótipos, através de cultura celular de mioblastos. Os resultados obtidos contribuirão para a melhor compreensão dos processos biológicos relacionados com a maior taxa de crescimento apresentada pelo tambaqui e a maior adaptação a temperaturas baixas observada em pacus. Considerando a utilização dos resultados mais específicos e de maior aplicabilidade, espera-se identificar possíveis biomarcadores e/ou alvos genéticos relacionados com o vigor híbrido apresentado pelo tambacu. Além disso, serão obtidos dados relevantes em relação ao padrão de expressão de mRNAs e microRNAs entre os genótipos avaliados, com ênfase em sequências relacionadas ao crescimento muscular. (AU)