Estudo de biomarcadores proteicos e perfil de expressão gênica da via do nf-™b na sepse neonatal tardia: valor potencial no diagnóstico e prognóstico

Resumo

A disponibilização de um painel de biomarcadores, proteicos ou gênicos, que possa diferenciar mais precocemente SIRS de sepse e, ainda, identificar diferentes padrões de resposta causados por agentes etiológicos distintos, pode causar impacto significativo na morbimortalidade da sepse neonatal, contribuindo para a redução dos custos hospitalares e, ainda, diferenciar um bom ou mau prognóstico. O objetivo é descrever a expressão proteica e gênica de biomarcadores selecionados em recém-nascidos (RN) de termo com sepse tardia clínica e / ou comprovadamente causada por bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos, no dia do diagnóstico (dia 0), na fase intermediária (dia 3) e na fase de convalescência dia (7). Amostras de sangue serão colhidas de 108 RN distribuídas em grupos de acordo com o agente etiológico: RN com sepse comprovada causada por bactérias Gram-positivas (Grupo 1, n = 27); causada por bactérias Gram-negativas (Grupo 2, n = 27); causada por fungos (Grupo 3, n = 27) e; RN com sepse tardia clínica (Grupo 4, n = 27). Amostras de sangue de 27 RN distribuídos entre os quatro grupos de estudo serão colhidas na fase de cura para comporem o grupo controle. Os biomarcadores proteicos solúveis sTREM, IL-27, MBL, CX3CL1, Hepcidina, Endocan e IL-18 serão avaliados pelo método de ELISA, assim como a expressão de CD64 na superfície de neutrófilos e monócitos por citometria de fluxo. Para a expressão gênica, será realizado o sequenciamento de nova geração dos genes relacionados com a via de sinalização do fator nuclear Kappa B (NF-8B), utilizando o Kit TruSeq Targeted RNA Expression NF-™B panel customizado para adicionar os genes TREM-1, IL-27, IL-18, MBL2, CX3CL1, HAMP (hepcidina) e ESM1 (Endocan) (Illumina Inc.). A análise estatística será feita pelo programa GraphPad Prism 5.0 e, além da análise estatística descritiva, serão realizados testes paramétricos ou não paramétricos de acordo com a distribuição dos dados. Valores de p < 0,05 serão considerados estatisticamente significativos. (AU)