Tempol: potencial terapia antioxidante para fibras musculares distróficas

Resumo

O estresse oxidativo tem sido considerado um dos principais fatores da fisiopatogênese das distrofias musculares, em especial da distrofia muscular de Duchenne (DMD). Apesar da concentração elevada de enzimas antioxidantes, como a superóxido dismutase, catalase e glutationa, observada nos pacientes distróficos e no camundongo mdx, o sistema antioxidante não consegue restabelecer o equilíbrio do organismo. Diante do exposto, levantamos a hipótese que o tratamento com Tempol, um mimético da SOD e que também atua de forma semelhante à catalase, poderia apresentar potencial efeito sobre as fibras musculares distróficas. Sendo assim, o presente trabalho tem como objetivo verificar o potencial efeito antioxidante do Tempol in vitro e in vivo sobre as fibras musculares distróficas de camundongos mdx. Para os estudos in vitro serão utilizadas culturas primárias de células musculares de camundongos das linhagens mdx (modelo experimental da DMD) e C57BL/10 (controle). Células mdx serão tratadas com Tempol, células mdx não tratadas e células C57BL/10 serão utilizadas como controle. Após o tratamento, as células musculares serão utilizadas para determinar a viabilidade celular, o estresse oxidativo, o sistema antioxidante enzimático e os indicadores inflamatórios. Para os estudos in vivo, camundongos mdx com 14 dias de vida pós-natal serão divididos em 3 grupos experimentais: salina, prednisolona e tempol. Camundongos da linhagem C57BL/10 serão utilizados como controle e não receberão nenhum tipo de tratamento. Avaliação da força muscular será realizada antes e após o tratamento. Após o tratamento, o músculo diafragma (DIA) dos grupos experimentais será retirado e utilizado para avaliar o processo de degeneração/regeneração, o estresse oxidativo, o sistema antioxidante enzimático e o processo inflamatório através de análises morfológicas, bioquímicas, Western Blotting e extração de RNA total, transcrição reversa e real time-PCR. Os resultados serão submetidos à análise estatística através do teste ANOVA One Way seguido do teste Tukey. (AU)