Microfluídica para cultura 3D de h-AdMSCs em ácido hialurônico livre ou estruturado em esponjas: quimiotaxia e quimiocinese em resposta a gradientes de fatores de crescimento de L-PRP

Resumo

O plasma rico em plaquetas (PRP) é um produto autólogo obtido do sangue total, capaz de estimular a regeneração tecidual. O PRP é composto de plaquetas, que são fonte rica em fatores de crescimento (FCs), e leucócitos (chamado L-PRP), que possui funções específicas nos processos celulares, como angiogênese, mitogênese, quimiotaxia, proliferação e diferenciação. Os FCs são um dos três componentes requeridos para a proliferação celular, juntamente com as células progenitoras, responsáveis pela capacidade gênica, e scaffolds, a matriz que conduz a proliferação. L-PRP ativado é capaz de formar redes de fibrina, que são scaffolds naturais. Ácido hialurônico (AH) é um glicosaminoglicano encontrado em matrizes extra celulares (MEC) e tem sido utilizado combinado com L-PRP ativado como scaffold para crescimento celular, promovendo um efeito sinérgico na regeneração óssea, com resultados clínicos de sucesso. No entanto, existe uma falta de estudos fundamentais e pré-clínicos envolvendo as interações entre células, scaffolds e FCs liberados do L-PRP. A microfluídica é uma tecnologia que vem sendo usada recentemente para cultivo celular 3D, devido as suas diversas vantagens em relação ao cultivo convencional, como: criação de microambiente in vitro que melhor mimetiza o modelo in vivo habilidade de manipular pequenos volumes de fluidos no meio de perfusão quantificação do comportamento celular em resposta a gradientes de concentração baixo consumo de reagentes. O objetivo principal deste projeto é a utilização de FCs liberados do L-PRP em ensaios de cultivo de células mesenquimais de tecido adiposo humano (h-AdMSCs) e de diferenciação osteogênica e condrogênica na presença de AH livre ou em esponjas (de baixa e alta massa molar) em plataforma microfluídica. Além disso, pretende-se estudar a quimiotaxia e quimiocinese para avaliar a migração celular em resposta a gradientes de FCs. (AU)