Alterações morfofuncionais nos melanomacrófagos hepáticos de Physalaemus cuvieri (Anura: Leptodactylidae) induzidas pelo contaminante benzo[alfa]pireno.

Resumo

Anuros são vulneráveis a diversos poluentes. O benzo[alfa]pireno (BaP) é um contaminante com propriedades hepatotóxicas, imunotóxicas e genotóxicas. Metabolizado pela enzima P450 (CYP1A1) produz subprodutos tóxicos que podem levar à morte dos organismos. Porém, células de defesa auxiliam no processo de detoxificação. Melanomacrófagos (MMs) são células fagocíticas que produzem melanina, e os grânulos de melanina podem agregar/dispersar pelo citoesqueleto (microtúbulos e filamentos de actina). De acordo com a hipótese de que o BaP é genotóxico, afeta a produção de melanina, os microtúbulos e a fagocitose, nossos objetivos serão: avaliar a dispersão da área de melanina dos MMs hepáticos; quantificar a produção de melanina dos MMs; avaliar atividade fagocítica dos MMs, alterações do BaP no citoesqueleto; avaliar efeitos genotóxicos. Conforme a hipótese de que o ±-naftoflavona (Anf), inibidor da CYP, reduz os subprodutos do BaP, temos o objetivo de analisar como o Anf atua, realizando as mesmas análises feitas com o BaP. Os tempos serão de 48 horas e 7 dias, as doses serão 2mg/kg de BaP e 20mg/kg de Anf. Haverá experimentos com BaP; azul de tripan + BaP; Anf + BaP; azul de tripan + Anf + BaP. Para as análises histológicas seguir-se-ão os procedimentos para inclusão em historesina e análise em microscopia de luz da área de melanina e fagocitose (azul de tripan). A quantidade de melanina será medida por ELISA. Para os microtúbulos, pellets com MMs serão analisados em microscópio de fluorescência. Para anormalidades nucleares o sangue será extraído e seguir-se-ão os procedimentos para análise. (AU)