Caracterização estrutural de efetores do sistema de secreção do tipo II (T2SS) de Acinetobacter baumannii

Resumo

Acinetobacter baumannii é um patógeno nosocomial responsável por milhões de infecções hospitalares por ano em pacientes debilitados. Este patógeno tornou-se mais relevante nos últimos anos devido aos grandes índices de resistência a antibióticos a ele associados, entrando na lista de bactérias prioritárias para desenvolvimento de novos tratamentos da Organização Mundial da Saúde. Seus mecanismos de infecção e toxicidade são pouco conhecidos em relação a outros patógenos, o que causa um entrave no desenvolvimento de novos tratamentos contra este microrganismo. Sabe-se que A. baumannii possui um sistema de secreção do tipo II (T2SS) envolvido na patogenicidade, que exporta a protease CpaA e a lipase LipA para o meio extracelular, entretanto o papel destes efetores na infecção ainda não foi estabelecido. Estas proteínas dependem de chaperonas no periplasma para que sejam exportadas (CpaB e LipB, respectivamente), outro fato ainda sem explicação. Este projeto tem como objetivo caracterizar estruturalmente as proteínas CpaA e LipA, tanto na presença quanto na ausência das chaperonas CpaB e LipB, contribuindo para a elucidação do mecanismo de transporte no T2SS e seu papel na patogenicidade. Serão realizadas a clonagem, expressão e purificação das enzimas e das suas respectivas chaperonas, para que passem por ensaios de cristalização e posteriormente difração de raios-X para resolução das estruturas tridimensionais. Ensaios biofísicos serão realizados para estudar as interações entre os pares de proteínas e ensaios microbiológicos para o estudo de seu papel na virulência. Estes resultados representarão as primeiras informações em detalhe atômico sobre efetores do T2SS de A. baumannii, e abrirão novas portas para o desenvolvimento de tratamentos antibacterianos no futuro. (AU)