Bioluminescência de Fungos, Centopeia e Organismos Marinhos: Aspectos Químicos e Biológicos

Resumo

O presente projeto de pesquisa de pós-doutorado é baseado no projeto submetido e aprovado pela FAPESP 2017/22501-2. Como mencionado na proposta e devido ao perfil do Dr. Douglas, o mesmo poderá participar nas metas 5 e 6 da proposta. Mais especificamente na Meta 5, o pesquisador irá atuar: (i) no isolamento e quantificação dos intermediários biossintéticos das diversas rotas de produção de luciferinas, o que permitirá confirmar a rota de degradação bioluminescente e possível reciclagem enzimática das luciferinas, já fortemente sugerida no caso de fungos; (ii) na clonagem das enzimas Luz, HispS, H3H e CPH de diversos fungos e na determinação de suas atividades e outros parâmetros enzimáticos; e (iii) no estudo da regulação circadiana dos genes-relógio e dos genes luz, hisps, h3h e cph, bem como da evolução e filogenia destes genes. Na Meta 6, o pesquisador irá auxiliar na observação de campo, coleta, manutenção e criação laboratorial dos organismos bioluminescentes alvos deste projeto: fungos, centopeias e poliquetas; auxiliar na purificação e identificação das luciferinas e de derivados de luciferinas dos organismos estudados, aquelas já conhecidas e as que forem descobertas; colaborar com o estudo mecanístico detalhado da bioluminescência de fungos; auxiliar na investigação do mecanismo de emissão de luz em centopeias e poliquetas; e na determinação de rendimentos quânticos, parâmetros enzimáticos e correlações de energia livre. As Metas 5 e 6 também envolvem a extração de RNA e DNA para a obtenção de transcritomas e genomas, o preparo de bibliotecas de cDNA e a condução de experimentos de clonagem e purificação de proteínas dos organismos em estudo.