O papel dos AGEs na ativação dos PRRs pela mibrobiota intestinal de camundongos alimentados com dieta rica em gordura e sacarose

Resumo

A presente proposta será desenvolvida para expandir os objetivos do projeto original que está sendo desenvolvido no Brasil (bolsa concedida pela FAPESP no Brasil - 2020/06397-3 - Universidade de São Paulo), visando avaliar o papel dos produtos finais de glicação avançada (AGEs) na senescência celular de células beta pancreáticas de camundongos obesos e camundongos com história de obesidade. O objetivo é aproveitar as técnicas baseadas em células embrionárias de rim humano (HEK 293) que superexpressam diferentes Receptores de Reconhecimento de Padrões (PRRs) e nas quais o elemento responsivo ao NF-kappaB é acoplado à fosfatase alcalina secretada (SEAP). Usaremos essas células para avaliar o papel dos AGEs na ativação do TLR2, TLR4, NOD1 e NOD2 pela microbiota intestinal de camundongos alimentados com uma dieta rica em gordura e sacarose (HFHS). Para atingir esse objetivo, realizaremos protocolos em que os camundongos serão alimentados com HFHS em combinação com o inibidor da síntese de AGEs (aminoguanidina). Um protocolo utilizando metilglioxal, o principal precursor na formação de AGEs, também será realizado. Os dados de ativação do TLR2, TLR4, NOD1 e NOD2 pela microbiota intestinal serão correlacionados com parâmetros de permeabilidade intestinal (análises histológicas do epitélio intestinal, conteúdo de muco e expressão de ocludina 1). A presente proposta testará se fatores sistêmicos resultantes da hiperglicemia crônica podem ser capazes de moldar a microbiota intestinal por modular a atividade dos PRRs e a permeabilidade intestinal. (AU)