Trânsito intestinal lento e composição da microbiota intestinal na gênese da resistência à insulina em ratos Goto-Kakizaki

Resumo

O rato Goto-Kakizaki (GK) desenvolve diabetes mellitus tipo 2 (DM2) espontaneamente, sem apresentar obesidade. Nosso grupo observou redução da velocidade do trânsito intestinal e aumento na expressão de marcadores pró-inflamatórios no intestino delgado de ratos GK com 16 semanas. O plexo mioentérico faz parte do sistema nervoso entérico (SNE) e é responsável por controlar a motilidade intestinal. O plexo mioentérico do intestino delgado de ratos GK apresenta diferenças em relação à densidade dos neurônios inibitórios no duodeno (diminuída) e no jejuno (aumentada). O estado diabético por sua vez causa complicações no SNE e na microbiota intestinal. Acreditamos que o trânsito intestinal mais lento (constipação intestinal) pode desencadear resistência periférica à insulina (RI) e DM2 nos ratos GK ao promover alteração na composição da microbiota. Esta hipótese será investigada no mesmo animal em diferentes idades (desmame- 21, 60 e 120 dias). Durante o período experimental, serão avaliados os seguintes parâmetros: motilidade intestinal por gavagem de azul de metileno, permeabilidade intestinal por gavagem de ácido fluoresceína-5-6-sulfônica, concentração de LPS (lipopolissacarídeos) no plasma, análise metagenômica da composição da microbiota e sensibilidade periférica à insulina por testes de tolerância à glicose e à insulina. Um coquetel de antibióticos será administrado aos animais na água, desde o desmame até 60 dias de idade nos ratos GK e Wistar, para induzir depleção da microbiota intestinal. Com esse protocolo, será possível investigar a influência que a microbiota intestinal exerce na gênese do fenótipo diabético dos ratos GK. Após o tratamento, serão avaliadas a sensibilidade periférica à insulina, permeabilidade e motilidade intestinal. A população total de neurônios (HuC/D) e as subpopulações inibitória (nNOS) e excitatória (ChAT) juntamente com a glia (S100) do plexo mioentérico serão estudadas por imunofluorescência em preparado de membrana. (AU)