Relação entre a capacitação espermática e a fertilidade de sêmen criopreservado de touros Nelore: ênfase no perfil de microRNAs e na metabolômica espermáticos

Resumo

O potencial de fertilidade do sêmen criopreservado de touros tem sido intensamente estudado, mesmo assim ainda não há a compreensão de todos os processos que estão envolvidos no sucesso da fecundação, dentre estes se destaca o da capacitação espermática. Devido à alta condensação do DNA, os espermatozoides são inertes aos processos de transcrição e tradução e dependem de transcritos adquiridos durante a espermatogênese e trânsito pós-testicular. Neste sentido, o papel pós-transcricional dos RNAs é fundamental, podendo regular a tradução de proteínas. Dentre esses, os microRNAs tem se destacado como potenciais reguladores da fertilidade e usados como biomarcadores, pois possuem funções efetivas nos processos que os espermatozoides passam até fecundar o oócito, incluindo os eventos ligados à capacitação espermática e ao desenvolvimento embrionário. Além disso, os eventos moleculares da capacitação espermática incluem proteínas, aminoácidos, lipídeos, carboidratos, ácidos nucleicos e outras moléculas orgânicas e inorgânicas, as quais podem ser avaliadas por meio da metabolômica, capaz de avaliar e determinar o perfil dessas pequenas moléculas. Para a compreensão da relação entre a capacitação espermática e a fertilidade do sêmen criopreservado de bovinos, com ênfase nos perfis de miRNAs e metabolômico espermáticos, este projeto de pesquisa compreenderá três experimentos. No experimento 1 amostras de sêmen in natura e criopreservadas de 12 touros da raça Nelore serão avaliadas quanto aos eventos da capacitação espermática, diferenciando daqueles efeitos causados durante o processo da criopreservação do sêmen; a partir destas técnicas as amostras serão classificadas de acordo com a responsividade à capacitação espermática in vitro. No experimento 2 serão utilizados os quatro touros de maior e os quatro touros de menor responsividade à capacitação, classificados no experimento 1, e serão comparados quanto aos perfis de miRNAs e metabólicos, na busca de biomarcadores relacionados aos eventos da capacitação espermática. No experimento 3 serão avaliadas partidas de sêmen criopreservado comercial de conhecida fertilidade quanto aos eventos da capacitação espermática, utilizando as técnicas do experimento 1, e quanto aos perfis metabólicos e de miRNAs, definidos no experimento 2. Com os resultados deste estudo, pretende-se elucidar melhor os mecanismos espermáticos que podem interferir negativamente na fertilidade do sêmen, incluindo miRNAs e metabólitos, e contribuir para o diagnóstico da falha da fertilidade de partidas de sêmen criopreservado antes de serem utilizadas nos programas de IATF, evitando-se a obtenção de baixas taxas de prenhez, resultando em maior eficiência reprodutiva e possibilitando o aumento da produtividade da bovinocultura para o Brasil e o mundo. (AU)