Investigação de novas formas hereditárias de perda auditiva e seu mecanismo fisiopatológico

Resumo

O sentido da audição é crucial para a interação humana com o meio ambiente e sua disfunção ouperda pode ter um impacto social, financeiro, vocacional e educacional ao longo da vida. A surdez, perda oudeficiência auditiva, é um dos distúrbios mais heterogêneos conhecidos. Apresenta vasta heterogeneidadeclínica (sindrômica e não sindrômica) e etiológica, pois somente para as formas não sindrômicas existemmais de 180 regiões cromossômicas candidatas mapeadas em estudos realizados em diversas populações.Apesar disso, apenas 136 desses genes foram identificados, o que ilustra a árdua tarefa de identificar osgenes da perda auditiva. Formas clinicamente semelhantes podem ser causadas por genes diferentes,enquanto diferentes variantes no mesmo gene podem levar a diferentes quadros clínicos, sindrômicos ounão, e até mesmo com diferentes padrões de herança. Cada forma genética de perda auditiva éindividualmente rara e apresenta peculiaridades clínicas, relações genótipo-fenótipo e fisiopatologia,revelando assim as vias biológicas passíveis de intervenção terapêutica. A população brasileira tem enormepotencial para descobrir novas relações genótipo-fenótipo e revelar novas vias biológicas fundamentais paraa audição. Estudos de mapeamento, descoberta de novos genes e estudos funcionais só são possíveis emlaboratórios que possuem coleções de amostras de famílias interessantes e bem estudadas clinicamente,como é o caso do nosso laboratório, com mais de 500 casos avaliados clinicamente e cuja causa em cerca de80% delas, possivelmente genéticas, ainda carecem de investigação. Sobretudo com relação a perda auditivacujo tecido humano é inacessível e os modelos animais nem sempre recapitulam a variante patogênica e/ouforma de perda auditiva, os modelos celulares derivados de células dos próprios pacientes se mostram muitopromissores para atender a demanda por conhecer a fisiopatologia e desenvolver novas maneiras de tratar aperda auditiva. No último auxílio FAPESP estabelecemos quatro linhagens iPSC a partir de células de afetadose normounvites da família DFNA58, cuja descrição da assinatura genômica, uma duplicação genômica,também foi realizada por meio de auxílio anterior. Existem muitos casos familiais com genes a seremdesvendados dentre aqueles de nossa casuística e para os quais modelos iPSC seriam de grande valia noestudo da perda auditiva. Esse projeto de pesquisa tem como objetivo mapear quais são os genes, jáconhecidos ou não, que contribuem para a perda auditiva no Brasil, estabelecer correlações genótipofenótipoe caracterizar mecanismos fisiopatológicos a fim nortear quais genes devem estar presentes empainéis de genes, bem como quais vias biológicas devem receber mais atenção para o desenvolvimento de3intervenções terapêuticas. Assim, a pesquisa será realizada por meio de três vertentes: 1) Mapear os genesrelacionados a fisiopatologia da audição no Brasil, como também novas variantes e as relações genótipofenótipo,por meio de painéis NGS e exoma, como também explorando diferentes estratégias para pesquisade variantes nem sempre detectáveis por estas técnicas NGS. 2) Estudar por meio de espectrometria demassa, proteínas diferencialmente expressas a partir de cócleas murinas em diferentes condiçõesfisiopatológicas. 3) Construir modelos celulares baseados na indução de pluripotência em células depacientes com perda auditiva, por meio da diferenciação dessas iPSC em tipos de células auditivas,caracterizando as diferenças fenotípicas e de expressão gênica das iPSC obtidas do sangue de pacientes comperda auditiva genética em relação a iPSC de indivíduos ouvintes (controles), não apenas para o modeloDFNA58, mas para o estudo de novas variantes e genes que identificarmos, não apenas relacionados a esteestudo, mas também de outros projetos desenvolvidos no LIM32. (AU)