Estudos de ligação de uma proteína alvo putativa de C. pseudotuberculosis do Metabolismo da Vitamina B12

• Processo: 19/05905-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Raghuvir Krishnaswamy Arni
• Beneficiário: Raghuvir Krishnaswamy Arni
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Vinculado à bolsa: 18/07572-3 - Explorando a protease nsP2 dos vírus Chikungunya e Mayaro: estruturas e inibição., BP.PD
• Assunto(s): Biologia estrutural Corynebacterium pseudotuberculosis
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: conformational changes | corynebacterium pseudotuberculosis | Precorrin-4 C(11)-methyltransferase | Vitamin B12 | Biologia Estrutural

Resumo

A vitamina B12 atua como cofator de várias reações metabólicas importantes nos organismos vivos. A biossíntese da vitamina B12 é restrita aos procariontes, o que significa que todos os organismos eucarióticos devem adquirir essa molécula através da dieta. Este estudo apresenta a investigação do metabolismo da vitamina B12 e a caracterização da precorrina-4C (11) -metiltransferase (CobM), enzima envolvida na biossíntese da vitamina B12 em Corynebacterium pseudotuberculosis. A análise do genoma de C. pseudotuberculosis identificou duas vias dependentes de vitamina B12, que podem ser fortemente afetadas por um metabolismo vitamínico interrompido.Experiências de dinâmica molecular, dicroísmo circular e RMN-STD identificaram regiões em CobM que sofrem alterações conformacionais após a ligação de s-adenosil-L-metionina para promover a interação de precorrina-4, um precursor da vitamina B12. A ligação de s-adenosil-L-metionina foi examinada juntamente com a ligação competitiva de adenina, dATP e suramina.Baseado em expericias de espectroscopia de fluoresccia, a constante de dissociao para os quatro ligandos e a protea alvo pode ser determinada; SAM (1,4 + 0,7), adenina (17,8 1,5), dATP (15,8 2,0) e Suramina (6,3 1,1).Os resultados fornecem informações ricas para investigações futuras de potenciais alvos de drogas dentro do metabolismo da Vitamina B12 de C. pseudotuberculosis e vias relacionadas para reduzir a virulência do patógeno em seus hospedeiros. (AU)