DNA de tripla hélice na heterocromatina de Drosophila

• Processo: 19/09206-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Animal
• Pesquisador responsável: Eduardo Gorab
• Beneficiário: Eduardo Gorab
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/02588-6 - Aspectos moleculares de regiões cromossômicas terminais de dípteros da famíla Sciaridae, AP.R
• Assunto(s): Mutação DNA Drosophila
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dna | Drosophila | hetrocromatina | mutação | Tripla Helice | genética molecular animal

Resumo

Resumo: Cadeias polinucleotídicas que obedecem ao emparelhamento de Watson-Crick podem formar complexos não canônicos como ácidos nucléicos de tripla-hélice. Desde sua caracterização inicial in vitro, tem havido evidência crescente para sua sua ocorrência in vivo, embora a maioria dela permanece indireta, particularmente para DNA de tripla-hélice. Aqui, diferentes abordagens foram empregadas para especificar sequências de DNA de triple-hélice. Anticorpos anti-tripla hélice caracterizados previamente reagem com regiões centroméricas e também com a secção 59E de mutantes portadores do alelo brown dominante, indicando que repetições AAGAG estão envolvidas na tripla hélice. Sondas complementares a repetição hibridam sem a denaturação do DNA cromossômico, como esperado para a formação de tripla hélice intramolecular na qual DNA de simples fita coexiste com a tripla hélice. Além disto, laranja de tiazol (TO), previamente descrito como capaz de reproduzir os resultados obtidos com anticorpos anti-tripla, interage com as repetições AAGAG, validando portanto os dois métodos de detecção. Fenótipo e estrutura nuclear não usuais de Drosophila mutante estão correlacionados a conformação não canônica das repetições AAGAG. Das abordagens que levam a identificação de tripla hélice em cromossomos, as facilidades proporcionadas pelo TO podem ampliar a busca de DNA de tripla hélice em genomas. (AU)