Estudo do efeito do butirato de sódio sobre os receptores de ácidos graxos de cadeia curta no sistema nervoso entérico de camundongos submetidos à Colite Ulcerativa experimental

• Processo: 22/00086-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2026
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: Patricia Castelucci
• Beneficiário: Patricia Castelucci
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Sistema nervoso entérico Ácidos graxos voláteis Butiratos Neuroglia Colite ulcerativa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácidos graxos de cadeia curta | células gliais entéricas | Colite ulcerativa experimental | Plexo mioentérico | Sistema Nervoso Entérico | sistema nervoso entérico

Resumo

A inflamação intestinal afeta os neurônios entéricos. O Butirato é um ácido graxo de cadeia curta produzido pelas bactérias da microbiota intestinal, a partir da fermentação das fibras alimentares. Ele se liga aos receptores de ácidos graxos acoplados à proteína G, como o GPR41, GPR43 e GPR109 e, contribui para a manutenção da barreira intestinal, proteção contra patógenos e como um anti-inflamatório. Tem sido observada a presença de receptores de ácidos graxos de cadeia curta no sistema nervoso entérico. A literatura demonstra que o Butirato de sódio tem sido promissor no tratamento da colite ulcerativa devido aos seus efeitos anti-inflamatórios e neuromoduladores. Diante disto, este projeto tem por objetivo estudar os receptores GPR41, GPR43 e GPR109 e, analisar o efeito do uso do Butirato de sódio nos neurônios do plexo mioentérico de camundongos submetidos à colite ulcerativa experimental que expressam os receptores GPR41, GPR43 e GPR109. Para isto, será injetado o 2, 4, 6, ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) no intestino grosso de animais C57BL/6 e no grupo Sham será injetado o veículo (álcool). Os animais submetidos à colite serão tratados com Butirato de Sódio, via gavagem, e o grupo Sham receberá um volume equivalente de salina. Os animais serão eutanasiados 7 e 14 dias após a injeção de TNBS ou veículo e o tratamento do Butirado de Sódio. Serão analisados: A) A colocalização dos receptores GPR41, GPR43 e GPR109 com neurônios imunorreativos ao óxido nítrico sintase neuronal (nNOS), Acetilcolina Transferase (ChAT), Calretina (Carl), PGP9.5 (pan- neuronal) e com o marcador pan-glial GFAP; B) Neurônios/gânglio positivos aos receptores GPR41, GPR43 e GPR109, à nNOS, ChAT, Calr, PGP9.5 e das células gliais entéricas imunorreativas à proteína fibrilar glial ácida (GFAP); C) As áreas dos perfis dos neurônios imunorreativos a nNOS, ChAT, Calr, PGP9.5; D) A morfologia do colo distal pela técnica de histologia, utilizando-se coloração de Hematoxilina & Eosina, Ácido Periódico de Schiff (PAS) e Picrosirius Red; E) a motilidade intestinal; F) a expressão proteica e expressão gênica caspase-3, do NF-º², da histona deacetilase, das MAPKinases; G) Análise da microbiota intestinal; H) Análise dos receptores de GPR41, GPR43 e GPR109 em pacientes com Retocolite Ulcerativa ou Doença de Crohn e I) Estudo de culturas de células primárias do neurônios plexo miontérico e estudo In vitro. Os resultados serão expressos em média ± erro-padrão e será feita a análise estatística. (AU)