Crp3 na mecanotransdução modulando o fenótipo de células musculares lisas

• Processo: 23/03079-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Ayumi Aurea Miyakawa Yamaguchi
• Beneficiário: Ayumi Aurea Miyakawa Yamaguchi
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carla Cristina Polo ; Christoph Ballestrem ; José Eduardo Krieger ; Miriam Helena Fonseca-Alaniz
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/09911-3 - Crp3 na mecanotransdução modulando o fenótipo de células musculares lisas, BP.TT; 24/12223-9 - Influência do Crp3 nas propriedades biomecânicas da aorta e na mecanotransdução de células musculares lisas durante o envelhecimento, BP.PD; 23/14702-9 - Modulação da sinalização de Crp3 nas adesões focais e sua influência nas propriedades mecânicas celulares e da matriz extracelular, BP.TT
• Assunto(s): Mecanotransdução Biomecânica Células musculares Sistema cardiovascular Cisteína Glicina Matriz extracelular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomecânica celular | células muscular lisa | mecanotransdução | Cardiovascular

Resumo

As células musculares lisas (SMC) são os principais constituintes celulares da camada média vascular, controlam as propriedades contráteis do vaso e o fluxo sanguíneo. Já é bem demonstrado que alterações de forças mecânicas na parede vascular tem papel importante no desenvolvimento de doenças como aterosclerose, aneurismas e doença do enxerto venoso. O nosso laboratório demonstrou que a proteína rica em cisteína e glicina - 3 (Crp3) é expressa em SMCs arteriais e normalmente ausente em SMCs venosas. Entretanto, quando submetidos ao ambiente arterial, mimetizando as adaptações da veia safena utilizada na revascularização cardíaca, demonstramos que o estiramento induz a expressão de Crp3 em SMCs venosas. Dados não publicados demonstram que o Crp3 se localiza nas adesões focais e modula a sinalização mediada por Fak. As adesões focais estão ligadas ao citoesqueleto de actina contribuindo para as propriedades mecânicas e a contratilidade das SMCs, alterando a organização da matriz extracelular (ECM). Os fatores que influenciam este processo não são completamente conhecidos e, neste trabalho, testaremos a hipótese de que o Crp3 modula a sinalização nas adesões focais, influenciando na contratilidade das SMCs de aorta e nas propriedades mecânicas celulares e da ECM. Serão utilizadas SMCs extraídas de aorta de ratos selvagens e knockouts para Crp3 (Crp3-KO). O perfil de expressão molecular global será avaliado em SMCs selvagens e Crp3-KO. Além disto, será identificado as proteínas que interagem com o Crp3 através da técnica de BioID. Estas informações bioquímicas/moleculares serão associadas com os parâmetros de rigidez e força de adesão celular avaliadas por microscopia de força atômica (AFM) e as propriedades contráteis avaliadas por ensaio de contração de gel de colágeno. A organização diferenciada das fibras de colágeno da ECM e impactos na morfologia serão avaliados pela técnica de imagem por difração de raio-X coerente (CDI) e correlacionados com dados funcionais das SMCs e da sinalização das adesões focais. Entender as propriedades mecânicas das SMCs é crítico para esclarecer os mecanismos subjacentes das doenças vasculares associadas ao estresse mecânico, possibilitando desenvolver novas abordagens terapêuticas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE OLIVEIRA, LUCIANA RENATA; FERNANDES, MATHEUS GIMENEZ; PATANE, JOSE SALVATORE LEISTER; SCHWARTZ, JEAN-MARC; KRIEGER, JOSE EDUARDO; BALLESTREM, CHRISTOPH; MIYAKAWA, AYUMI AUREA. Exploring focal adhesion data: dynamic parameter extraction from FRAP and FLAP experiments using chemical master equation. FRONTIERS IN MOLECULAR BIOSCIENCES, v. 12, p. 15-pg., 2025-05-06. (23/03079-9, 14/50889-7)