Análise da Expressão do microRNoma (circulantes e vesiculares) e assinatura proteolítica no plasma de pacientes com carcinoma espinocelular peniano e avaliação prognóstica

• Processo: 24/16137-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2027
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Claudio Bovolenta Murta
• Beneficiário: Claudio Bovolenta Murta
• Instituição Sede: Instituto do Câncer do Estado de São Paulo Octavio Frias de Oliveira (ICESP). Coordenadoria de Serviços de Saúde (CSS). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Alexis Germán Murillo Carrasco ; André Zelanis Palitot Pereira ; José Pontes Junior ; Kátia Ramos Moreira Leite ; Kayann Kaled Reda El Hayek ; Maria José Ferreira Alves ; Miyuki Uno ; Roger Chammas ; Tatiane Katsue Furuya ; William Carlos Nahas
• Assunto(s): Biomarcadores MicroRNAs Prognóstico Proteoma Urologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomarcadores | microRNA | Neoplasia de pênis | prognóstico | Proteoma | Urologia

Resumo

INTRODUÇÃO: O câncer de pênis, apesar de ser uma ocorrência rara em países ocidentais, representa até 20% das neoplasias que afetam a população masculina em países em desenvolvimento. Os principais indicadores de prognóstico incluem o estágio patológico e o grau tumoral. Apesar de serem úteis na prática clínica, esses fatores frequentemente apresentam desempenho abaixo do desejado. O tratamento cirúrgico para tumores localizados envolve a penectomia, juntamente com a linfadenectomia inguinal, resultando em altas taxas de sobrevida livre de recorrência. Contudo, quando ocorre envolvimento dos linfonodos, os resultados do tratamento cirúrgico são menos satisfatórios. E, até o presente momento, não existem terapias sistêmicas eficazes e as taxas de resposta à radioterapia são limitadas. A literatura sugere que fenômenos epigenéticos, como a expressão de microRNAs (miRNA), desempenham um papel significativo na carcinogênese de várias neoplasias. Nossa linha de pesquisa já demonstrou dois miRNAs (miR-421 e o miR-744-5p) associados a metástases em tecido de pacientes com câncer de pênis. Numa sequência aos nossos estudos iniciais, acreditamos que estes possíveis novos biomarcadores em câncer de pênis (miR-421 e o miR-744-5p) estejam também superexpressos no sangue de pacientes com doença metastática. Aventamos a hipótese também que outro perfil de expressão de miRNA no sangue e em vesículas extracelulares, bem como um perfil proteolítico no sangue destes pacientes, esteja associado ao prognóstico desfavorável do tumor. Acreditamos que a compreensão desses padrões possa levar à identificação de novos marcadores prognósticos.OBJETIVOS: Confirmar a superexpressão no plasma, dos dois miRNAs (miR-421 e o miR-744-5p) superexpressos em tecidos de pacientes com doença metastática. Identificar no plasma e vesículas extracelulares, os miRNAs diferencialmente expressos entre pacientes com doença metastática versus localizada. Avaliar um perfil proteolítico no plasma de pacientes com doença metastática em comparação aos pacientes com doença localizada. Como objetivo secundário, faremos as mesmas correlações das expressões de miRNAs e perfil proteolítico com os fatores clássicos de prognóstico em câncer de pênis. Desta forma, poderemos sugerir biomarcadores de prognóstico ou terapia alvo.MÉTODOS: Foram coletados sangue total de 30 pacientes com carcinoma espinocelular (CEC) de pênis operados em nossa instituição entre julho de 2015 a janeiro de 2018. Estes pacientes foram seguidos prospectivamente com exame físico e exames de imagem para avaliação de metástases. Após a penectomia, os pacientes tiveram sua doença classificada de acordo com o risco para metástase conforme a classificação da Sociedade Europeia de Urologia. Pacientes com doença de baixo risco foram apenas seguidos e aqueles com doença de risco intermediário ou alto, bem como aqueles com linfonodomegalia clínica, foram submetidos a linfadenectomia inguinal bilateral. Para cada amostra do plasma serão separadas três alíquotas: extração de miRNA, purificação das vesículas extracelulares e extração do miRNA e análise proteômica resultante da atividade proteolítica no plasma. Através da utilização de TaqMan" Array Cards serão identificados os miRNAs livre circulantes e vesiculares diferentemente expressos entre os pacientes com doença metastática e localizada; e, pela técnica de TAILS, será identificado um perfil proteolítico entre estes grupos de pacientes. Por técnica de qRT-PCR serão validados os miRNAs identificados inicialmente, além do miR-421 e do miR-744-5p superexpressos nos tecidos de pacientes metastáticos. A seguir faremos a associação dos achados dos miRNAs e perfil proteolítico com o grau tumoral, estádio patológico, invasão perineural, invasão angiolinfática, recidiva tumoral e sobrevida livre de recorrência, câncer específica e global.DESCRITORES: Neoplasia de pênis, microRNA, Prognóstico, Biomarcadores. (AU)