Estudo da sequencia de direcionamento da proteina thi1 e suas implicacoes fisiologicas.

• Processo: 96/09124-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1997
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 1999
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Márcio de Castro Silva Filho
• Beneficiário: Márcio de Castro Silva Filho
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Reparo do DNA Regulação da expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biossintese De Tiamina | Direcionamento De Proteinas | Regulacao Genica | Reparo De Dna

Resumo

A localização específica das proteínas dentro das células é condição essencial para o seu funcionamento. Apesar de apresentarem DNA próprio, a maior parte das proteínas mitocondriais e cloroplásticas são codificadas por genes nucleares e sintetizadas nos ribossomos citosólicos sob a forma de precursores. Estas moléculas apresentam na extremidade amino-terminal seqüências de direcionamento conhecidas como pré-sequência (mitocôndrias) e peptídeo de trânsito (cloroplastos). A importação de proteínas no interior destas organelas é bastante específica, o que pode ser comprovado experimentalmente. Entretanto, em alguns casos este direcionamento foi inespecífico. Recentemente, foi relatado um caso em que uma proteína, envolvida no mecanismo de defesa das plantas contra o estresse oxidativo, foi direcionada, simultaneamente, a mitocôndrias e cloroplastos (Creissen et al., 1995). Ao clonarem um cDNA de Arabidopsis thaliana envolvido no reparo de DNA de Escherichia coli, Machado et al. (1996) verificaram que o produto do gene thI1 está relacionado à biossíntese de tiamina. A análise de sua seqüência primária revelou a presença de um sinal de direcionamento típico de proteínas cloroplásticas. Uma observação muito interessante mostra que em plantas superiores, a biossíntese de tiamina ocorre nos cloroplastos (Belanger et al., 1995), enquanto que em fungos, a síntese ocorre nas mitocôndrias (Beldwell et al., 1989). Baseado nestas observações, torna-se extremamente interessante estudar o direcionamento da proteína THI1 e as propriedades de sua seqüência de direcionamento. Além disso, a presença de metioninas na parte N-terminal da proteína madura pode indicar um mecanismo de regulação gênica envolvendo a escolha do ATG que inicia a tradução. Desta forma, serão realizadas construções gênicas ligando a seqüência de direcionamento a um gene repórter, a fim de esclarecer a localização da proteína THI1 e suas implicações fisiológicas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CHABREGAS, SABRINA M.; LUCHE, DOUGLAS D.; FARIAS, LEONARDO P.; RIBEIRO, ALBERTO F.; VAN SLUYS, MARIE-ANNE; MENCK, CARLOS F. M.; SILVA-FILHO, MARCIO C.. Dual targeting properties of the N-terminal signal sequence of Arabidopsis thaliana THI1 protein to mitochondria and chloroplasts. Plant Molecular Biology, v. 46, n. 6, p. 639-650, 2001. (98/11119-7, 96/09124-7)