Análise da regeneração da medula espinhal após enxertos de nervos ou inoculação de células de Schwann em presença do fator neurotrófico derivado de células gliais (GDNF)

• Processo: 99/01319-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2002
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Gerson Chadi
• Beneficiário: Gerson Chadi
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Imuno-histoquímica Regeneração nervosa Medula espinhal Fator neurotrófico derivado de linhagem de célula glial Astrócitos Células de Schwann Cultura de células
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Astrocito | Celula Schwann | Cultura De Celula | Fator Neurotrofico | Imunohistoquimica | Regeneracao Nervosa

Resumo

Ratos jovens serão submetidos à hemitransecção da medula espinhal ao nível torácico inferior. Segmentos de nervos intercostais do mesmo animal serão enxertados ou células de Schwann cultivadas de ratos neonatos serão inoculadas no espaço deixado pela lesão. O fator neurotrófico derivado de células gliais (GDNF) será continuamente infundido próximo ao local da ferida por um período de 7 dias, com o auxílio de uma mini-bomba osmótica. Os animais serão submetidos a 6 tomadas, com intervalos de 15 dias, de análise comportamental computadorizada onde parâmetros de locomoção, salto e movimentos serão registrados. Um grupo de animais receberá injeção do traçador neuronal retrógrado fluoro-gold na região do corno anterior da medula espinhal ipsilateral à lesão e distal a ela. Após 90 dias do término da infusão do fator neurotrófico os animais serão sacrificados e os seus cérebros e medula espinhal preparados para a análise quantitativa imunohistoquímica. Fibras nervosas marcadas pela imunorreatividade do neurofilamento e pela proteína associada à micro túbulos (MAP2) serão acompanhadas por segmentos medulares proximais a distais à lesão, incluindo a área do enxerto. A presença da bainha de mielina nas fibras nervosas regeneradas será analisada pela marcação imunohistoquímica dupla do neurofilamento e proteína básica de mielina, utilizando-se cromógenos diferentes. O estado de atividade do astrócito e da microglia será observado pela imunohistoquímica da proteína fibrilar ácida glial (GFAP) e OX 42, respectivamente. A expressão celular do fator básico de crescimento de fibroblastos (bFGF) será também analisada por esta técnica. Os preparados serão quantificados por dois métodos distintos: o número, a quantidade dos prolongamentos e o volume dos perfis celulares imunorreativos serão conseguidos pelo método estereológico de quantificação de partículas na terceira dimensão e a intensidade das imunomarcações será quantificada pela análise microdensitométrica de imagem. (AU)

Publicações científicas

(16)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVA, CAMILA; FUXE, KJELL; CHADI, GERSON. Involvement of Astroglial Fibroblast Growth Factor-2 and Microglia in the Nigral 6-OHDA Parkinsonism and a Possible Role of Glucocorticoid Hormone on the Glial Mediated Local Trophism and Wound Repair. JOURNAL OF NEURAL TRANSMISSION-SUPPLEMENTA, n. 73, p. 185-202, 2009. (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)

JULIANA MILANI SCORISA; TATIANA DUOBLES; GABRIELA PINTAR DE OLIVEIRA; JESSICA RUIVO MAXIMINO; GERSON CHADI. Revisão dos métodos de obtenção de células não neuronais para o estudo da fisiopatologia da Esclerose Lateral Amiotrófica ao nível molecular in vitro. Acta Cirurgica Brasileira, v. 25, n. 3, p. 281-289, 2010-06-00. (07/00491-3, 99/01319-1, 98/13122-5)

GOMIDE‚ V.C.; DE FRANCISCO‚ A.C.; CHADI‚ G.. Localization of neurotensin immunoreactivity in neurons and organ of corti of rat cochlea. HEARING RESEARCH, v. 205, n. 1, p. 1-6, 2005. (98/13122-5, 99/01319-1)

CHADI‚ G.; GOMIDE‚ VC. FGF-2 and S100β immunoreactivities increase in reactive astrocytes‚ but not in microglia‚ in ascending dopamine pathways following a striatal 6-OHDA-induced partial lesion of the nigrostriatal system. Cell Biology International, v. 28, n. 12, p. 849-861, 2004. (98/13122-5, 99/01319-1)

RAMOS ANDRADE, MICHELE SCHULTZ; MENDONCA, LUCIO MARIO; CHADI, GERSON. Treadmill running protects spinal cord contusion from secondary degeneration. Brain Research, v. 1346, p. 266-278, JUL 30 2010. (99/01319-1, 01/14957-8, 07/00491-3, 98/13122-5, 00/02131-5, 09/14214-7)

DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR; DUOBLES, TATIANA; CASTELUCCI, PATRICIA; CHADI, GERSON. Differential regulation of FGF-2 in neurons and reactive astrocytes of axotomized rat hypoglossal nucleus. A possible therapeutic target for neuroprotection in peripheral nerve pathology. ACTA HISTOCHEMICA, v. 112, n. 6, p. 604-617, 2010. (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)

CHADI, GERSON; MAXIMINO, JESSICA RUIVO; DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR. The importance of molecular histology to study glial influence on neurodegenerative disorders. Focus on recent developed single cell laser microdissection. Journal of Molecular Histology, v. 40, n. 4, p. 241-250, AUG 2009. (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)

CHADI‚ G.; SILVA‚ C.; MAXIMINO‚ J.R.; FUXE‚ K.; DA SILVA‚ G.O.. Adrenalectomy counteracts the local modulation of astroglial fibroblast growth factor system without interfering with the pattern of 6-OHDA-induced dopamine degeneration in regions of the ventral midbrain. Brain Research, v. 1190, p. 23-38, 2008. (07/00491-3, 98/13122-5, 99/01319-1)

CECATTO‚ R.B.; CHADI‚ G.. The importance of neuronal stimulation in central nervous system plasticity and neurorehabilitation strategies. FUNCTIONAL NEUROLOGY, v. 22, n. 3, p. 137-143, 2007. (07/00491-3, 98/13122-5, 99/01319-1)

SILVA, CAMILA; FUXE, KJELL; CHADI, GERSON. Involvement of Astroglial Fibroblast Growth Factor-2 and Microglia in the Nigral 6-OHDA Parkinsonism and a Possible Role of Glucocorticoid Hormone on the Glial Mediated Local Trophism and Wound Repair. JOURNAL OF NEURAL TRANSMISSION-SUPPLEMENTA, v. N/A, n. 73, p. 18-pg., 2009-01-01. (07/00491-3, 99/01319-1, 98/13122-5)

ANDRADE‚ MSR; HANANIA‚ FR; DACI‚ K.; LEME‚ RJA; CHADI‚ G.. Contuse lesion of the rat spinal cord of moderate intensity leads to a higher time-dependent secondary neurodegeneration than severe one: An open-window for experimental neuroprotective interventions. TISSUE & CELL, v. 40, n. 2, p. 143-156, 2008. (07/00491-3, 98/13122-5, 99/01319-1, 00/02131-5, 01/14957-8)

JOÃO GABRIEL MARTINS DALLO; BERNARDO VERGARA REICHERT; JOSÉ BENEDITO RAMOS VALLADÃO JÚNIOR; CAMILA SILVA; BIANCA APARECIDA DE LUCA; BEATRIZ DE FREITAS AZEVEDO LEVY; GERSON CHADI. Respostas astrocitárias na medula espinal do rato submetido ao esmagamento duplo do nervo ciático e tratado com injeção local de suspensão de células de Schwann cultivadas ou de extrato de medula espinal lesada: implicações na terapia celular para o reparo do nervo. Acta Cirurgica Brasileira, v. 22, n. 6, p. 485-494, 2007-12-00. (07/00491-3, 99/01319-1, 98/13122-5)

DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR; MAXIMINO, JESSICA RUIVO; LIN, CHIN JIA; CHADI, GERSON. A method to immunolabel rodent spinal cord neurons and glia for molecular study in specific laser microdissected cells involved in neurodegenerative disorders. Journal of Molecular Histology, v. 40, n. 3, p. 217-225, JUN 2009. (99/01319-1, 98/13122-5, 04/08926-0, 07/00491-3)

GUZEN, FAUSTO PIERDONA; DE ALMEIDA LEME, RICARDO JOSE; RAMOS DE ANDRADE, MICHELE SCHULTZ; DE LUCA, BIANCA APARECIDA; CHADI, GERSON. Glial cell line-derived neurotrophic factor added to a sciatic nerve fragment grafted in a spinal cord gap ameliorates motor impairments in rats and increases local axonal growth. RESTORATIVE NEUROLOGY AND NEUROSCIENCE, v. 27, n. 1, p. 1-16, 2009. (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)

GOMIDE, VANIA C.; LAUREANO, MAURA R.; SILVEIRA, GILCELIO A.; CHADI, GERSON. Neuropeptide Y in Rat Spiral Ganglion Neurons and Inner Hair Cells of Organ of Corti and Effects of a Nontraumatic Acoustic Stimulation. International Journal of Neuroscience, v. 119, n. 4, p. 508-530, 2009. (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)

RICARDO JOSÉ DE ALMEIDA LEME; GERSON CHADI. Ativação microglial e astroglial à distância secundárias a lesão da medula espinhal. Arquivos de Neuro-Psiquiatria, v. 59, p. 483-492, 2001-09-00. (98/13122-5, 99/01319-1)