Utilização de células tronco mesenquimais na interface do sistema nervoso central e periférico: reparo de lesões proximais

• Processo: 14/06892-3
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Vigência: 01 de junho de 2014 - 31 de janeiro de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira
• Beneficiário: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira
• Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Pesq. associados: Sergiy Kyrylenko
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/25478-9 - Efeito neuroprotetor e imunomodulatório do dimetil-fumarato (DMF) após avulsão e reimplante de raízes motoras medulares, BP.MS; 15/18513-0 - Treinamento em técnicas laboratoriais - Laboratório de Regeneração Nervosa, BP.TT; 14/11921-2 - Utilização de células tronco mesenquimais na interface do Sistema Nervoso Central e Periférico: Reparo de lesões proximais, BP.TT
• Assunto(s): Neurobiologia Células-tronco adultas Células-tronco embrionárias Células-tronco mesenquimais Regeneração da medula espinal Medula espinhal Plasticidade neuronal

Resumo

Estudos recentes têm indicado grande potencial neuroprotetor das células tronco (CT), quando enxertadas no sistema nervoso após lesão. O emprego de CTs adultas apresenta significativa vantagem em relação às de origem embrionária, devido à facilidade de obtenção. Por outro lado, CT embrionárias possuem maior espectro de efeitos, podendo, inclusive se diferenciar em tipos celulares de diferentes folhetos. Assim, o presente estudo visa investigar a influência do enxerto de células tronco mesenquimais (CTM) no microambiente medular após lesão de raízes nervosas ou da substância branca do funículo lateral. Adicionalmente, o emprego do selante de fibrina, como substrato para as CTM, pode contribuir positivamente para o sucesso regenerativo no SNC e será empregado neste projeto. Paralelamente ao uso de CTMs, empregaremos células tronco embrionárias humanas, modificadas por bioengenharia para superexpressar FGF2 humano de modo induzido. Após a lesão medular, será realizado (1) RT-PCR em tempo real para VEGF, IL4, IL3, TNF±, IL6, arginase-1, iNOS, e TGF², (2) imunohistoquímica (IH) com dupla marcação para IBA1 (marcador de microglia e macrófagos) e Arginase-1 (marcador de macrófago M2) para demonstração in situ da presença/reatividade de tais células e (3) marcação dos transcritos que anteriormente foram analisados por PCR (e apresentaram diferenças de expressão entre os grupos experimentais) através de FISH, co-localizando esses transcritos com as CTM EGFP e demais tipos celulares como astrócitos e microglia, marcados por imunohistoquímica. Complementarmente, serão realizadas (1) contagem neuronal por coloração de Nissl e (2) imunohistoquímica para sinaptofisina (marcador de sinapses). A recuperação motora será acompanhada pelo teste comportamental para a análise da marcha dos animais (Catwalk). Em conjunto, esperamos obter resultados que subsidiem o futuro uso terapêutico das CTs em lesões medulares, propiciando maior sobrevivência neuronal, menor formação de cicatriz glial e maior sucesso na recuperação da motricidade pós lesão. (AU)

Publicações científicas

(27)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MENEZES CARVALHO, NAHANNA ZIMMERMANN; CHIAROTTO, GABRIELA BORTOLANCA; BERNARDES, DANIELLE; GELINSKI KEMPE, PAULA REGINA; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Neuroprotection by dimethyl fumarate following ventral root crush in C57BL/6J mice. Brain Research Bulletin, v. 164, p. 184-197, NOV 2020. Citações Web of Science: 1.

BOMBEIRO, ANDRE LUIS; NUNES PEREIRA, BRUNA TOLEDO; BONFANTI, AMANDA PIRES; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Immunomodulation by dimethyl fumarate treatment improves mouse sciatic nerve regeneration. Brain Research Bulletin, v. 160, p. 24-32, JUL 2020. Citações Web of Science: 0.

BOMBEIRO, ANDRE LUIS; DE MELO LIMA, BRUNO HENRIQUE; BONFANTI, AMANDA PIRES; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Improved mouse sciatic nerve regeneration following lymphocyte cell therapy. Molecular Immunology, v. 121, p. 81-91, MAY 2020. Citações Web of Science: 0.

RIBEIRO, PATRICIA; CASTRO, V, MATEUS; PEREZ, MATHEUS; CARTAROZZI, LUCIANA P.; SPEJO, ALINE B.; CHIAROTTO, GABRIELA B.; AUGUSTO, TAIZE M.; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R. Toll-like receptor 4 (TLR4) influences the glial reaction in the spinal cord and the neural response to injury following peripheral nerve crush. Brain Research Bulletin, v. 155, p. 67-80, FEB 2020. Citações Web of Science: 0.

MORREY, JOHN D.; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R.; WANG, HONG; ZUKOR, KATHERINE; DE CASTRO, MATEUS VIDIGAL; SIDDHARTHAN, VENKATRAMAN. Zika virus infection causes temporary paralysis in adult mice with motor neuron synaptic retraction and evidence for proximal peripheral neuropathy. SCIENTIFIC REPORTS, v. 9, DEC 20 2019. Citações Web of Science: 0.

CHIAROTTO, GABRIELA BORTOLANCA; CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; PEREZ, MATHEUS; BISCOLA, NATALIA PERUSSI; SPEJO, ALINE BARROSO; GUBERT, FERNANDA; FRANCA JUNIOR, MARCONDES; MENDEZ-OTERO, ROSALIA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Tempol improves neuroinflammation and delays motor dysfunction in a mouse model (SOD1(G93A)) of ALS. JOURNAL OF NEUROINFLAMMATION, v. 16, n. 1 NOV 14 2019. Citações Web of Science: 0.

DE CASTRO, MATEUS VIDIGAL; RAMOS DA SILVA, MONIZE VALERIA; CHIAROTTO, GABRIELA BORTOLANCA; VOLPE, BRUNO BOSH; SANTANA, MARIA HELENA; MALHEIROS LUZO, ANGELA CRISTINA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Reflex arc recovery after spinal cord dorsal root repair with platelet rich plasma (PRP). Brain Research Bulletin, v. 152, p. 212-224, OCT 2019. Citações Web of Science: 0.

CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; PEREZ, MATHEUS; KIRCHHOFF, FRANK; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Role of MHC-I Expression on Spinal Motoneuron Survival and Glial Reactions Following Ventral Root Crush in Mice. CELLS, v. 8, n. 5 MAY 2019. Citações Web of Science: 1.

SPEJO, ALINE BARROSO; TELES, CAROLINE BRANDAO; ZUCCOLI, GIULIANA DA SILVA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Synapse preservation and decreased glial reactions following ventral root crush (VRC) and treatment with 4-hydroxy-tempo (TEMPOL). Journal of Neuroscience Research, v. 97, n. 4, p. 520-534, APR 2019. Citações Web of Science: 0.

BERNARDES, DANIELLE; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Regular Exercise Modifies Histopathological Outcomes of Pharmacological Treatment in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis. FRONTIERS IN NEUROLOGY, v. 9, NOV 20 2018. Citações Web of Science: 2.

BOMBEIRO, ANDRE LUIS; NUNES PEREIRA, BRUNA TOLEDO; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor improves mouse peripheral nerve regeneration following sciatic nerve crush. European Journal of Neuroscience, v. 48, n. 5, p. 2152-2164, SEP 2018. Citações Web of Science: 1.

SPEJO, A. B.; CHIAROTTO, G. B.; FERREIRA, A. D. F.; GOMES, D. A.; FERREIRA JR, R. S.; BARRAVIERA, B.; OLIVEIRA, A. L. R. Neuroprotection and immunomodulation following intraspinal axotomy of motoneurons by treatment with adult mesenchymal stem cells. JOURNAL OF NEUROINFLAMMATION, v. 15, AUG 14 2018. Citações Web of Science: 6.

MOZAFARI, ROGHAYEH; KYRYLENKO, SERGIY; CASTRO, MATEUS VIDIGAL; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Combination of heterologous fibrin sealant and bioengineered human embryonic stem cells to improve regeneration following autogenous sciatic nerve grafting repair. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 24, APR 12 2018. Citações Web of Science: 5.

CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; RIEDER, PHILLIP; BAI, XIANSHU; SCHELLER, ANJA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE; KIRCHHOFF, FRANK. In vivo two-photon imaging of motoneurons and adjacent glia in the ventral spinal cord. JOURNAL OF NEUROSCIENCE METHODS, v. 299, p. 8-15, APR 1 2018. Citações Web of Science: 6.

CHIAROTTO, GABRIELA BORTOLANCA; NARDO, GIOVANNI; TROLESE, MARIA CHIARA; FRANCA, JR., MARCONDES CAVALCANTE; BENDOTTI, CATERINA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. The Emerging Role of the Major Histocompatibility Complex Class I in Amyotrophic Lateral Sclerosis. INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, v. 18, n. 11 NOV 2017. Citações Web of Science: 1.

BERNARDES, DANIELLE; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Comprehensive catwalk gait analysis in a chronic model of multiple sclerosis subjected to treadmill exercise training. BMC Neurology, v. 17, AUG 22 2017. Citações Web of Science: 5.

ARAUJO, MARTA ROCHA; KYRYLENKO, SERGIY; SPEJO, ALINE BARROSO; CASTRO, MATEUS VIDIGAL; FERREIRA JUNIOR, RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Transgenic human embryonic stem cells overexpressing FGF2 stimulate neuroprotection following spinal cord ventral root avulsion. Experimental Neurology, v. 294, p. 45-57, AUG 2017. Citações Web of Science: 8.

ASSAF, KYL; LEAL, CLAUDENETE VIEIRA; DERAMI, MARIANA SILVEIRA; DE REZENDE DUEK, ELIANA APARECIDA; CERAGIOLI, HELDER JOSE; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Sciatic nerve repair using poly(epsilon-caprolactone) tubular prosthesis associated with nanoparticles of carbon and graphene. BRAIN AND BEHAVIOR, v. 7, n. 8 AUG 2017. Citações Web of Science: 4.

BOMBEIRO, ANDRE LUIS; RODRIGUES HELL, RAFAELA CHITARRA; SIMOES, GUSTAVO FERREIRA; DE CASTRO, MATEUS VIDIGAL; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Importance of major histocompatibility complex of class I (MHC-I) expression for astroglial reactivity and stability of neural circuits in vitro. Neuroscience Letters, v. 647, p. 97-103, APR 24 2017. Citações Web of Science: 3.

BISCOLA, NATALIA PERUSSI; CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; ULIAN-BENITEZ, SUZANA; BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS VIDIGAL; SPEJO, ALINE BARROSO; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, n. 1 MAR 14 2017. Citações Web of Science: 19.

NATALIA PERUSSI BISCOLA; LUCIANA POLITTI CARTAROZZI; SUZANA ULIAN-BENITEZ; ROBERTA BARBIZAN; MATEUS VIDIGAL CASTRO; ALINE BARROSO SPEJO; RUI SEABRA FERREIRA JR.; BENEDITO BARRAVIERA; ALEXANDRE LEITE RODRIGUES OLIVEIRA. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, p. -, 2017.

INACIO, RODRIGO FABRIZZIO; ZANON, RENATA GACIELLE; DE CASTRO, MATEUS VIDIGAL; DE SOUZA, HENRIQUE MARQUES; BAJGELMAN, MARCIO CHAIM; VERINAUD, LIANA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Astroglioma conditioned medium increases synaptic elimination and correlates with major histocompatibility complex of class I (MHC I) upregulation in PC12Cells. Neuroscience Letters, v. 634, p. 160-167, NOV 10 2016. Citações Web of Science: 1.

BOMBEIRO, ANDRE L.; SANTINI, JULIO C.; THOME, RODOLFO; FERREIRA, ELISANGELA R. L.; NUNES, SERGIO L. O.; MOREIRA, BARBARA M.; BONET, IVAN J. M.; SARTORI, CESAR R.; VERINAUD, LIANA; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R. Enhanced Immune Response in Immunodeficient Mice Improves Peripheral Nerve Regeneration Following Axotomy. FRONTIERS IN CELLULAR NEUROSCIENCE, v. 10, JUN 14 2016. Citações Web of Science: 12.

BISCOLA, NATALIA PERUSSI; CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; FERREIRA JUNIOR, RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Long-Standing Motor and Sensory Recovery following Acute Fibrin Sealant Based Neonatal Sciatic Nerve Repair. NEURAL PLASTICITY, 2016. Citações Web of Science: 8.

DE CASTRO, MATEUS VIDIGAL; BARBIZAN, ROBERTA; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Direct Spinal Ventral Root Repair following Avulsion: Effectiveness of a New Heterologous Fibrin Sealant on Motoneuron Survival and Regeneration. NEURAL PLASTICITY, 2016. Citações Web of Science: 4.

CARTAROZZI, LUCIANA P.; SPEJO, ALINE B.; FERREIRA, JR., RUI S.; BARRAVIERA, BENEDITO; DUEK, ELIANA; CARVALHO, JULIANA L.; GOES, ALFREDO M.; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R. Mesenchymal stem cells engrafted in a fibrin scaffold stimulate Schwann cell reactivity and axonal regeneration following sciatic nerve tubulization. Brain Research Bulletin, v. 112, p. 14-24, MAR 2015. Citações Web of Science: 22.

BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS V.; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R. Long-Term Spinal Ventral Root Reimplantation, but not Bone Marrow Mononuclear Cell Treatment, Positively Influences Ultrastructural Synapse Recovery and Motor Axonal Regrowth. INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, v. 15, n. 11, p. 19535-19551, NOV 2014. Citações Web of Science: 10.