Emprego de selante de fibrina combinado com células tronco mesenquimais para o reparo de lesão no funículo anterior: efeitos sobre a inflamação, neuroproteção e regeneração axonal.

• Processo: 12/22750-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira
• Beneficiário: Aline Barroso Spejo
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/19954-2 - Regeneração de aferências primárias direcionadas a motoneurônios medulares por meio de terapia gênica com neurotrofina-3, BE.EP.DR
• Assunto(s): Fármacos neuroprotetores Neuroproteção Células-tronco mesenquimais Plasticidade neuronal Neurociências Inflamação Regeneração nervosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células tronco mesenquimais | Inflamação | lesão de funículo anterior | Neuroproteção | Plasticidade sináptica | Regeneração nervosa | Neurociência

Resumo

A limitada capacidade regenerativa dos neurônios no sistema nervoso central e a formação de um ambiente inibitório no local da injúria representam o principal desafio para regeneração e reparo de injúrias à medula espinal. Neste sentido, a influência das células tronco mesenquimais (CTM) no microambiente medular, formação da cicatriz glial e seus efeitos sobre a inflamação, controle da gliose reativa, sobrevivência neuronal e plasticidade sináptica em motoneurônios lesionados, torna-se um importante objeto de estudo. Adicionalmente, o emprego do selante de fibrina, como substrato para as CTM, pode contribuit positivamente para o sucesso regenerativo no SNC. CTM modificam o ambiente inflamatório na fase aguda e reduzem efeitos da cicatriz glial inibitória na fase subaguda e crônica, promovendo um ambiente permissivo à extensão axonal. Pode ainda, prover fatores de crescimento que promovem sobrevivência e elongação axonal através das lesões à medula espinal. Para avaliar o poder neuroprotetor, neuroregenerativo e modulatório da inflamação e cicatriz glial do tratamento com selante de fibrina e/ou terapia com CTM após uma lesão central, será realizada uma lesão perfurante na região do funículo anterior direito, nos níveis medulares L4 e L5 (n=5, por grupo experimental). Após sobrevida de 7 dias após a lesão será realizado (1) RT-PCR em tempo real para VEGF, IL4, IL3, TNF±, IL6, arginase-1, iNOS, e TGF² e (2) imunohistoquímica com dupla marcação para IBA1 (marcador de microglia e macrófagos) e Arginase-1 (marcador de macrófago M2) para demonstração in situ da presença/reatividade de tais células. Após sobrevida de 14 dias serão realizadas (1) contagem neuronal por coloração de Nissl e (2) imunohistoquímica para sinaptofisina (marcador de sinapses). Com sobrevida de 8 semanas, serão realizados (1) teste comportamental para a análise da marcha dos animais (Catwalk), (2) análise da cicatriz glial por FISH (hibridação in situ fluorescente) e IH. Neste procedimento serão duplamente marcados GFAP (marcador de astrócitos - IH) e Condroitin-sulfato (FISH), (3) análise da regeneração neuronal através da cicatriz glial por FISH e IH. Neste procedimento serão duplamente marcados neurofilamentos (IH) e GAP-43 (marcador de neurônio em regeneração - FISH) e (4) análise qualitativa da produção de colágeno e laminina por CTM através de IH.

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BISCOLA, NATALIA PERUSSI; CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; ULIAN-BENITEZ, SUZANA; BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS VIDIGAL; SPEJO, ALINE BARROSO; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, n. 1, MAR 14 2017. (12/20456-6, 12/08101-8, 14/06892-3, 12/22750-9, 12/02689-3, 11/23377-7, 11/02889-0, 13/04409-0, 09/53846-9, 14/11405-4, 10/00729-2, 13/23030-2, 12/13514-0)

SPEJO, A. B.; CHIAROTTO, G. B.; FERREIRA, A. D. F.; GOMES, D. A.; FERREIRA JR, R. S.; BARRAVIERA, B.; OLIVEIRA, A. L. R.. Neuroprotection and immunomodulation following intraspinal axotomy of motoneurons by treatment with adult mesenchymal stem cells. JOURNAL OF NEUROINFLAMMATION, v. 15, AUG 14 2018. (14/06892-3, 12/22750-9, 13/16168-8)

SPEJO, ALINE BARROSO; TELES, CAROLINE BRANDAO; ZUCCOLI, GIULIANA DA SILVA; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Synapse preservation and decreased glial reactions following ventral root crush (VRC) and treatment with 4-hydroxy-tempo (TEMPOL). Journal of Neuroscience Research, v. 97, n. 4, p. 520-534, APR 2019. (14/12707-4, 12/22750-9, 14/12671-0, 14/06892-3)

NATALIA PERUSSI BISCOLA; LUCIANA POLITTI CARTAROZZI; SUZANA ULIAN-BENITEZ; ROBERTA BARBIZAN; MATEUS VIDIGAL CASTRO; ALINE BARROSO SPEJO; RUI SEABRA FERREIRA JR.; BENEDITO BARRAVIERA; ALEXANDRE LEITE RODRIGUES OLIVEIRA. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, 2017-04-27. (13/23030-2, 11/23377-7, 12/02689-3, 12/20456-6, 14/06892-3, 14/11405-4, 11/02889-0, 13/04409-0, 12/08101-8, 09/53846-9, 12/22750-9, 12/13514-0, 10/00729-2)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SPEJO, Aline Barroso. Emprego de selante de fibrina combinado com células tronco mesenquimais para o reparo de lesão no funículo anterior: efeitos sobre a inflamação, neuroproteção e regeneração axonal. 2017. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.