Estudo molecular e funcional de transportadores de íons em membranas

• Processo: 99/12866-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2004
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Gerhard Malnic
• Beneficiário: Gerhard Malnic
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores principais: Antonio Carlos Cassola ; Margarida de Mello Aires ; Nancy Amaral Reboucas
• Bolsa(s) vinculada(s): 04/06451-5 - Modulacao funcional e genetica de nhe3 por vitamina d., BP.IC; 04/03521-2 - Fator regulador de nhe3 (nherf): clonagem da proteina de celulas okp e analise das celulas com supressao da expressao de nherf., BP.IC; 04/02226-7 - Modulação transcricional de NHE3 nas acidoses metabólicas e respiratórias, BP.IC; + mais bolsas vinculadas 01/09753-4 - Mecanismos de transporte de prótons em células de túbulo proximal de ratos: participação na regulação do pH, polaridade e modulação pelo paratormônio, BP.DR; 01/00013-8 - Efeito de enterotoxinas sobre transportadores reguladores do pH celular em células colônicas em cultura, BP.DR; 01/02897-0 - Estudo molecular e funcional de transportadores de íons em membranas, BP.TT; 00/13467-4 - Isquemia e pre-condicionamento isquemico renais: caracterizacao de mecanismos envolvidos na sua fisiopatologia., BP.DR; 99/09785-1 - Efeito hormonal na regulacao do ph intracelular., BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Membrana celular Transporte de íons Canais iônicos Angiotensinas Vasopressinas Proteína quinase C Rim Técnicas de Patch-Clamp
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Angiotensina | Cultura Celular | Patch-Clamp | Pcr | Permutador Na/H | Vasopressina
• Publicação FAPESP: https://media.fapesp.br/bv/uploads/publicacoes/pasta_morpho_45.pdf

Resumo

O objetivo geral do projeto é a investigação de mecanismos de transporte iônico em células de origem renal e em outros tecidos, do ponto de vista molecular e funcional. Com esta finalidade serão usadas metodologias de microperfusão de rim de rato in vivo, de microperfusão de túbulos isolados de rim de rato ou coelho in vitro, de biologia molecular incluindo a expressão de formas selvagens e mutantes de transportadores, de eletrofisiologia (patch clamp) para a análise de canais iônicos individuais, de regulação de volume celular e do papel de transportadores de membrana em sua regulação. Estes estudos serão realizados em rim de mamífero, em células de origem renal e intestinal e de outros tecidos em cultura (MDCK,T84 e outras) e de células de criptas colônicas. Serão investigados os mecanismos de secreção de H+ e de K+ (H+-ATPases, H+/K+-ATPases, permutador Na+/H+, canais de K+) e de bicarbonato (permuta CI-/HCO3-, cotransportador Na+/HCO3, processos passivos), bem como os efeitos de agentes hormonais como Angiotensina II, Aldosterona, Fator Natriurético Atrial, Hormônios da Tireoide, Parato-hormônio e Vasopressina isoladamente ou em combinação, nestes processos. Serão usadas técnicas que permitem a determinação de fluxos transepiteliais de H+, K+ e HCO3, isto é, microeletrodos sensíveis a protons e a potássio, bem como métodos para a avaliação de fluxos destes íons em membranas celulares individuais (apical e basolateral), através da medida do pH celular por mercadores fluorescentes e microeletrodos. Serão investigadas características moleculares do permutador Na+/H+, sua modulação genética e suas vias de sinalização celular, incluindo a identificação de isoformas de proteina quinase C envolvidas na modulação deste mecanismo de transporte em diferentes situações experimentais. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

AMORIM, JOSÉ B. O.; MUSA-AZIZ, RAIF; MELLO-AIRES, MARGARIDA; MALNIC, GERHARD. Signaling path of the action of AVP on distal K+ secretion. Kidney International, v. 66, n. 2, p. 696-704, Aug. 2004. (99/12866-3)

CARRARO-LACROIX, LUCIENE REGINA; RAMIREZ, MARCO ANTONIO; ZORN, TELMA M. T.; REBOUÇAS, NANCY AMARAL; MALNIC, GERHARD. Increased NHE1 expression is associated with serum deprivation-induced differentiation in immortalized rat proximal tubule cells. American Journal of Physiology : Renal Physiology, v. 291, n. 1, p. F129-F139, 2006. (99/12866-3)