Desenvolvimento de anticorpos monoclonais específicos para o receptor B1 de cininas humano

• Processo: 07/53712-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Neusa Pereira da Silva
• Beneficiário: Neusa Pereira da Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Assunto(s): Doenças inflamatórias Doenças autoimunes Anticorpos monoclonais Receptor B1 da bradicinina Cininas Ensaio de imunoadsorção enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos Monoclonais | Cininas | Elisa | Receptor B1 De Bradicinina

Resumo

O projeto tem por finalidade desenvolver anticorpos monoclonais específicos para o receptor B1 de cininas (BKRB1) humano para estudo de sua expressão em doenças inflamatórias crônicas auto-imunes. O BKRB1 parece ter um papel estratégico em doenças com um forte componente inflamatório como artrite reumatóide, esclerose múltipla, choque séptico e diabetes. Existe um crescente interesse no estudo desse receptor devido à importante participação do sistema calicreina-cinina na fisiopatologia de doenças inflamatórias crônicas e ao possível uso de antagonistas do RBKB1 como agentes terapêuticos. No momento, há poucas opções comerciais de anticorpos policlonais anti-BKRBI e não há nenhum anticorpo monoclonal disponível. O desenvolvimento de anticorpos monoclonais contra BKRB1 humano seria de grande interesse para o estudo da sua participação nos processos inflamatórios, permitindo, por exemplo, o uso de citometria de fluxo na caracterização de sua expressão em diferentes populações celulares. Para a produção dos anticorpos foram selecionados 3 peptídeos como imunógenos potenciais. Camundongos serão imunizados com uma emulsão do peptídeo conjugado a Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH) em adjuvante de Freund. Células esplências obtidas de camundongos bons respondedores serão fusionadas com uma linhagem estabelecida de mieloma. Após a fusão, os híbridos serão testados por ELISA para detecção de anticorpos específicos. Os híbridos de interesse serão clonados e os clones positivos serão expandidos e utilizados para produção de ascite em camundongos. Os anticorpos serão caracterizados quanto ao isotipo, purificados e testados quanto ao seu potencial uso na detecção do BKRB1 humano. (AU)