Comparação do perfil epigenético de genes relacionados a diferenciação neural murina em tipos celulares obtidos a partir de células tronco embrionárias diferenciadas in vitro e in vivo de células da massa celular interna de embriões

• Processo: 09/54510-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Joaquim Mansano Garcia
• Beneficiário: Joaquim Mansano Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Células-tronco embrionárias Epigênese genética Diferenciação celular Imunoprecipitação da cromatina Neurogênese Terapia baseada em transplante de células e tecidos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulas Tronco Embrionarias | Diferenciacao Celular | Epigenetica | Imunoprecipitacao De Cromatina | Murinos | Neurogenese

Resumo

A organização da cromatina das células eucarióticas, coordenada por modificações epigenéticas, permite que apenas uma parte do DNA seja utilizada para expressão gênica em cada tecido, determinando um padrão especifico em cada tipo celular. No entanto, estudos demonstram que o cultivo celular in vitro pode alterar este padrão através de modificações epigenéticas diferentes das que ocorrem no ambiente in vivo. A diferenciação neuronal a partir de células tronco embrionárias in vitro representa uma possibilidade para o tratamento de doenças neurodegenerativas através da terapia celular, porém avaliações das alterações destes neurônios produzidos in vitro são necessárias. No presente estudo, objetivamos estudar as modificações epigenéticas em alguns dos mais importantes genes responsáveis pela diferenciação neural (Mash1, Sox3, Pax3, Pax6) e neuronal (NeuroD, NEGR I, NEF3, Epha4), presentes em tipos celulares diferenciados in vitro e in vivo. Para tanto, células neurais em estádios de maturidade semelhantes terão seus padrões de acetilação e metilação de histonas H3 e H4, em algumas lisinas especificas sabidamente envolvidas na diferenciação neural, estudados e comparados, em grupos diferenciados in vitro a partir de células tronco embrionárias (CTE); in vivo a partir de CTE; a partir de células da massa celular interna de embriões controle. As células serão separadas utilizando anticorpos e colunas magnéticos, e o conteúdo de cromatina será separado e precipitado juntamente a anticorpos específicos (ChIP), e amplificado por PCR em tempo real. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

OLIVEIRA, CLARA SLADE; SARAIVA, NAIARA ZOCCAL; COELHO CRUZ, MARIA HELENA; MAZETI, BRUNA; OLIVEIRA, LETICIA ZOCCOLARO; LOPES, FLAVIA LOMBARDI; GARCIA, JOAQUIM MANSANO. HDAC inhibition decreases XIST expression on female IVP bovine blastocysts. Reproduction, v. 145, n. 1, p. 9-17, JAN 2013. (08/58370-0, 09/54510-4)