Influência de inibidores de síntese e absorção de colesterol na expressão de proteínas do transporte reverso do colesterol em células HepG2 e CACO-2

• Processo: 09/15125-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2012
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Rosario Dominguez Crespo Hirata
• Beneficiário: Rosario Dominguez Crespo Hirata
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Farmacogenética Hipolipemiantes Inibidores de hidroximetilglutaril-CoA redutases HDL-Colesterol Células CACO-2 Células Hep G2 Expressão de proteínas RNA mensageiro Transporte reverso de colesterol
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: estatinas | expressão gênica | ezetimiba | Farmacogenômica | Transporte reverso do Colesterol | Farmacogenomica

Resumo

Os inibidores de síntese (estatinas) e absorção intestinal (ezetimiba) do colesterol são potentes fármacos hipocolesterolemiantes que diminuem o risco de eventos coronarianos, principalmente pela redução do colesterol da lipoproteína de baixa densidade (LDL) no plasma. As estatinas também podem alterar a concentração do colesterol da lipoproteína de alta densidade (HDL), reconhecida como ateroprotetora, principalmente por seu papel no transporte reverso do colesterol (TRC). Entretanto, a resposta do colesterol da HDL ao tratamento com estatinas é bastante variável. Portanto é de interesse conhecer os mecanismos de regulação de proteínas envolvidas no TRC, como ATP-binding cassette transporter A1 e G1 (ABCA1 e ABCG1), apolipoproteína E (ApoE) e scavenger receptor BI (SRBI), mediados por hipolipemiantes. O objetivo deste estudo é investigar os efeitos de estatinas e ezetimiba sobre a expressão de ABCA1, ABCG1, ApoE e SRBI, em linhagens celulares de hepatocitos (HepG2) e enterócitos (Caco-2) humanos. As células serão incubadas com diferentes concentrações de hipolipemiantes para avaliação da viabilidade e fragmentação celular por microscopia e citometria de fluxo. A expressão de mRNA de ABCA1, ABCG1, ApoE e SRBI será avaliada por PCR em tempo real quantitativo (PCRq) e a expressão de proteinas por Western blotting e citometria de fluxo. A atividade de fatores de transcrição envolvidos na regulação desses genes, como LXR±, LXR² e SREBP2, será realizada por ensaio de mobilidade eletroforética retardada em gel de poliacrilamida (EMSA) que permite estudar as interações DNA-proteinas. Os efeitos de hipolipemiantes sobre a estabilidade dos transcritos serão medido por PCRq. Os resultados deste estudo contribuirão para o conhecimento dos mecanismos envolvidos na modulação da expressão de proteinas do TRC por hipolipemiantes. Esse conhecimento poderá auxiliar no desenvolvimento de novas estratégias farmacológicas que visem o incremento quanti e qualitativo da HDL no plasma e a redução de eventos coronarianos em pacientes com risco cardiovascular. (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CERDA, ALVARO; GENVIGIR, FABIANA DALLA VECCHIA; RODRIGUES, ALICE CRISTINA; VIEIRA WILLRICH, MARIA ALICE; DOREA, EGIDIO LIMA; SILVEIRA BERNIK, MARCIA MARTINS; ARAZI, SIMONE SORKIN; DE OLIVEIRA, RAQUEL; HIRATA, MARIO HIROYUKI; CRESPO HIRATA, ROSARIO DOMINGUEZ. Influence of Polymorphisms and Cholesterol-Lowering Treatment on SCARB1 mRNA Expression. JOURNAL OF ATHEROSCLEROSIS AND THROMBOSIS, v. 18, n. 8, p. 640-651, 2011. (09/15125-8)

CERDA, ALVARO; ISSA, MUSTAFA H.; GENVIGIR, FABIANA D. V.; ROHDE, CINTIA B.; CAVALLI, SELMA A.; BERTOLAMI, MARCELO C.; FALUDI, ANDRE A.; HIRATA, MARIO H.; HIRATA, ROSARIO D. C.. Atorvastatin and hormone therapy influence expression of ABCA1, APOA1 and SCARB1 in mononuclear cells from hypercholesterolemic postmenopausal women. JOURNAL OF STEROID BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 138, p. 403-409, NOV 2013. (09/15125-8)

GENVIGIR, FABIANA DALLA VECCFHIA; RODRIGUES, ALICE CRISTINA; CERDA, ALVARO; ARAZI, SIMONE SORKIN; VIEIRA WILLRICH, MARIA ALICE; OLIVEIRA, RAQUEL; HIRATA, MARIO HIROYUKI; DOREA, EGIDIO LIMA; BERNIK, MARCIA MARTINS; CURI, RUI; et al. Effects of lipid-lowering drugs on reverse cholesterol transport gene expressions in peripheral blood mononuclear and HepG2 cells. PHARMACOGENOMICS, v. 11, n. 9, p. 1235-1246, SEP 2010. (06/06196-0, 09/15125-8)

CERDA, ALVARO; GENVIGIR, FABIANA D. V.; WILLRICH, MARIA A. V.; ARAZI, SIMONE S.; BERNIK, MARCIA M. S.; DOREA, EGIDIO L.; BERTOLAMI, MARCELO C.; FALUDI, ANDRE A.; HIRATA, MARIO H.; HIRATA, ROSARIO D. C.. Apolipoprotein E mRNA expression in mononuclear cells from normolipidemic and hypercholesterolemic individuals treated with atorvastatin. LIPIDS IN HEALTH AND DISEASE, v. 10, NOV 10 2011. (09/15125-8)