Melanopsinas em vertebrados não mamíferos: função e transdução do sinal luminoso

• Processo: 09/15912-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Comparada
• Pesquisador responsável: Ana Maria de Lauro Castrucci
• Beneficiário: Ana Maria de Lauro Castrucci
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Sinalização intracelular Células fotorreceptoras Pigmentos da retina Melanopsinas Melanóforos Óxido nítrico Inativação gênica Nucleotídeos cíclicos Relógios biológicos Relógios circadianos periféricos Mamíferos Danio rerio Xenopus laevis
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células de Danio rerio | melanóforos de Xenopus laevis | melanopsinas | nucleotídeos cíclicos | óxido nítrico | retina de galinha | silenciamento genico | sinalização intracelular | Fisiologia de Relógios Periféricos

Resumo

O presente projeto tem como objetivo investigar a funcionalidade das duas melanopsinas (OPN4x e OPN4m), encontradas nos vertebrados não mamíferos, e também comparar a via de transdução de sinal intracelular destas em resposta a estímulo luminoso. Para que esse objetivo seja alcançado propomos que esta análise seja feita em culturas de células de vertebrados não mamíferos: cultura de células da retina de embriões de galinha; melanóforos do anfíbio Xenopus leavis; linhagem de células embrionárias ZEM-2S do teleósteo Danio rerio. Para avaliar a resposta de cada melanopsina, pretendemos silenciar a expressão gênica da outra nestes modelos celulares por meio de RNA de interferência. Acompanhar as respostas a estímulo luminoso com microscopia confocal, e identificar se as vias de transdução de sinal descritas na literatura para OPN4m em mamífero funcionam da mesma forma para as duas melanopsinas em vertebrados não mamíferos e portanto são redundantes nestes organismos, ou se diferenças entre estas podem significar a perda de um mecanismo de sincronização em mamíferos. (AU)