Mecanismos pró-inflamatórios envolvidos na ativação dos receptores P2X3 pelo ATP endógeno

• Processo: 08/55006-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Carlos Amilcar Parada
• Beneficiário: Carlos Amilcar Parada
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Receptores purinérgicos P2X3 Citocinas Mediadores da inflamação Nociceptores Trifosfato de adenosina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atp | Celulas Residentes | Citocinas | Inflamacao | Nociceptores | Receptores P2X3

Resumo

Embora em condições normais a expressão do receptor purinérgico P2X3 pareça ocorrer apenas nos neurônios aferentes primários, recentemente demonstramos que, na resposta inflamatória induzida pela carragemna, a ativação do receptor P2X3 contribui expressivamente não apenas com a hiperalgesia, mas também com a liberação de citocinas pró-inflamatórias. Portanto, o objetivo deste projeto é investigar o mecanismo pelo qual os receptores P2X3 modulam a produção de citocinas. Para tanto será avaliada a contribuição da ativação do receptor P2X3 neuronal ou presente em células residentes (macrófagos, mastócitos, fibroblastos e queratinócitos) na liberação das citocinas pró-inflamatórias TNF-α, IL-1β e CINC-1. Inicialmente, investigaremos se o tratamento com capsaicina, que destrói as fibras C (TRPV -1 sensíveis), reduz a liberação de TNF-α, IL-1β e CINC-1 no tecido subcutâneo da pata de ratos. Confirmada essa hipótese, verificaremos se o tratamento intratecal com antisense contra receptor P2X3 reduz a liberação de TNF-α, IL-1β e CINC-1. Além disso, investigaremos o papel dos mediadores inflamatórios neuronais, substância P e CGRP, na liberação das citocinas mediada pela ativação do receptor P2X3. Por imunofluorescência, investigaremos a expressão dos receptores P2X3 em macrófagos, mastócitos, queratinócitos e fibroblastos do tecido subcutâneo da pata de ratos após inflamação induzida pela administração subcutânea de carragenina. Uma vez demonstrada a expressão do receptor P2X3 nessas células, investigaremos se a administração subcutânea do antagonista de receptor P2X3, A - 317491, diminui a liberação das citocinas induzi das pela carragenina na pata de ratos cujas fibras C (TRPV -1 sensíveis) foram previamente destruídas pela capsaicina. Finalmente, investigaremos in vitro se a ativação do receptor P2X3 nas células (macrófagos, mastócitos, fibroblastos e/ou queratinócitos) que expressaram esse receptor induz liberação TNF-α, IL-1β e CINC-1. (AU)