Metapneumovírus aviário (aMPV): desenvolvimento de recombinantes expressando as glicoproteínas F e G

• Processo: 11/09919-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Clarice Weis Arns
• Beneficiário: Clarice Weis Arns
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Virologia veterinária
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem e expressão | Metapneumovírus Aviário | PCR em tempo real (RRT-PCR) | Proteína F | Proteína G | vetores adenovirais | Virologia Animal

Resumo

Metapneumovírus aviário (aMPV) é o agente etiológico da Rinotraqueíte dos perus (TRT, do inglês Turkey rhinotracheitis) e está associado à Síndrome da Cabeça Inchada (SHS, do inglês Swollen head syndrom) em galinhas. O aMPV é reconhecido como um dos principais patógenos de doenças respiratórias em aves e pertence à família Paramyxoviridae, subfamília Pneumovirinae, gênero Metapneumovirus. O presente projeto tem como finalidade construir recombinantes de adenovírus expressando as proteínas F e G do aMPV, utilizando a amostra viral ch/A/BR/668/03. O vírus será multiplicado em células da linhagem CER (chicken embryo related cells), e os adenovírus recombinantes serão testados e cultivados em células da linhagem HEK-293. Será extraído RNA total dos cultivos, seguido da síntese de cDNA e padronização das reações de PCR para o gene G a partir de primers descritos na literatura e para o gene F os primers serão desenhados pela equipe do laboratório de virologia. Serão utilizados dois sistemas de plasmídeos, um plasmídeo do tipo pShuttle e um segundo plasmídeo contendo o genoma de adenovírus com deleções dos genes E1 e E3. Os candidatos de vetores adenovirais carreando as proteínas F e G do aMPV serão testados quanto aos níveis de expressão de tais proteínas através da quantificação da transcrição dos genes F e G pela técnica PCR em tempo real (RRT-PCR) previamente estabelecido para a detecção do aMPV. (AU)