Estudos estruturais e funcionais com proteínas de veneno de serpentes nativas, recombinantes e complexadas com inibidores vegetais

• Processo: 12/06502-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Beneficiário: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Cristiano Luis Pinto de Oliveira ; Marcia Gallacci ; Ney Lemke
• Bolsa(s) vinculada(s): 14/04425-9 - Estudos estruturais e funcionais com proteínas de veneno de serpentes nativas, recombinantes e complexadas com inibidores vegetais, BP.TT; 12/24719-1 - Estudos estruturais e funcionais com proteínas de veneno de serpentes nativas, recombinantes e complexadas com inibidores vegetais, BP.TT
• Assunto(s): Venenos de serpentes Cristalografia de proteínas Envenenamento por animais peçonhentos Biologia estrutural Inibidores enzimáticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Molecular Estrutural | Cristalografia de Proteínas | Veneno de serpentes | Cristalografia de proteínas

Resumo

O envenenamento ofídico é um problema de saúde pública em muitos países tropicais e subtropicais e foi recentemente incluído na lista das Doenças Tropicais Negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde. Na América Latina, a grande maioria dos acidentes é causada por serpentes dos gêneros Bothrops e Crotalus. Um dos principais problemas associados ao envenenamento botrópico é o proeminente dano local causado pela picada destas serpentes, sendo que as fosfolipases A2 e as metaloproteases são os seus principais constituintes. Neste trabalho, nós propomos pela primeira vez, um amplo estudo para caracterização estrutural e funcional de proteínas de veneno de serpentes nativas, recombinantes e complexadas com potenciais agentes inibidores. Dentre as técnicas a serem utilizadas destacamos: cristalografia de raios X, espalhamento de raios X a baixo ângulo, dicroísmo circular, espalhamento dinâmico de luz, experimentos de afinidade (proteína-inibidor utilizando a técnica de calorimetria de titulação isotérmica), cromatografia analítica por exclusão de tamanho, mutação sítio-dirigida, docking, dinâmica molecular, análise filogenética e estudos funcionais in vitro envolvendo técnicas miográficas e eletrofisiologicas seguidos de análises morfológicas (microscopia ótica e microscopia eletrônica). A aquisição destas informações poderá ser de grande valia para a identificação, caracterização e desenvolvimento (drug design) de compostos com grande potencial de uso biotecnológico e farmacológico. Estes compostos poderiam ser utilizados para o controle de sintomas não eficientemente neutralizados pela soroterapia convencional e, também, no combate a diversos processos patológicos (coagulopatias, doenças inflamatórias degenerativas e auto-imunes, mal de Alzheimer, esquizofrenia, infecções virais, asma, câncer, entre outras) cujas etiologias estão relacionadas a moléculas pertencentes aos mesmos grupos de proteínas onde se encontram classificadas as toxinas botrópicas e crotálicas que serão estudadas. O projeto em solicitação é uma continuação de projetos anteriores apoiados pela FAPESP (quatro projetos aprovados na área de proteínas de veneno de serpentes) e CNPq (três projetos aprovados na área) desde 1997. Além destes projetos o laboratório é apoiado pelo INCT em Toxinologia (FAPESP/CNPq) e do projeto em Toxinologia da CAPES. Somente na área de proteínas de veneno de serpentes (o laboratório também atua em outras linhas de pesquisa utilizando técnicas de Biologia Estrutural) foram publicados pelo nosso grupo mais de 50 artigos científicos e concluídas 16 teses/dissertações na área. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TOYAMA, DANIELA DE OLIVEIRA; GAETA, HENRIQUE HESSEL; TERASHIMA DE PINHO, MARCUS VINICIUS; PENA FERREIRA, MARCELO JOSE; ROMOFF, PAULETE; MATIOLI, FABIO FILIPPI; MAGRO, ANGELO JOSE; DE MATTOS FONTES, MARCOS ROBERTO; TOYAMA, MARCOS HIKARI. An Evaluation of 3-Rhamnosylquercetin, a Glycosylated Form of Quercetin, against the Myotoxic and Edematogenic Effects of sPLA(2) from Crotalus durissus terrificus. BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL, 2014. (12/06502-5, 13/12077-8, 11/06704-4)

TOYAMA, DANIELA DE OLIVEIRA; GAETA, HENRIQUE HESSEL; TERASHIMA DE PINHO, MARCUS VINICIUS; PENA FERREIRA, MARCELO JOSE; ROMOFF, PAULETE; MATIOLI, FABIO FILIPPI; MAGRO, ANGELO JOSE; DE MATTOS FONTES, MARCOS ROBERTO; TOYAMA, MARCOS HIKARI. An Evaluation of 3-Rhamnosylquercetin, a Glycosylated Form of Quercetin, against the Myotoxic and Edematogenic Effects of sPLA(2) from Crotalus durissus terrificus. BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL, v. 2014, p. 11-pg., 2014-01-01. (13/12077-8, 11/06704-4, 12/06502-5)