Autofagia e glicogênio sintase quinase-3 (GSK3) como alvos moleculares capazes de aumentar a atividade de fármacos utilizados no tratamento de leucemias mielóides (aguda e crônica)

• Processo: 12/51215-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia
• Pesquisador responsável: Claudia Bincoletto Trindade
• Beneficiário: Claudia Bincoletto Trindade
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Antineoplásicos Leucemia mieloide Quinase 3 da glicogênio sintase Apoptose Autofagia Proteínas tirosina quinases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Autofagia | Glicogenio Sintase Quinase 3 | Inibidores De Tirosina Quinase | Leucemias

Resumo

Embora a autofagia seja bem conhecida como um processo fisiológico em que os componentes celulares são degradados pelos lisossomos, estudos atuais indicam que a autofagia pode também suprimir ou aumentar a sobrevivência de células tumorais. Nas leucemias, a autofagia geralmente encontra-se desregulada. Além disso, a via GSK3, a qual parece ter uma relação direta com a autofagia, tem sido apontada como importante moduladora do crescimento de células leucêmicas MLL, um sub-tipo de leucemia aguda extremamente agressivo e de pobre prognóstico. Sendo assim, este projeto visa entender a autofagia e a participação da via de sinalização GSK3 na morte e/ou sobrevivência de células leucêmicas. Para isto utilizando quatro linhagens celulares com características moleculares especificas como a HL60 (promielocítica-like), NB4 (leucemia pró-mielocítica), K562 leucemia mielóide crônica e Lucena (K-562 resistente a vincristina), pretendemos avaliar como a modulação da autofagia e da via GSK-3 altera a resposta da primeira linhagem a citosina arabinosídeo, da segunda linhagem ao ácido retinóico (ATRA) e das duas ultimas ao mesilato de imatinibe (MI) e nilotinibe. Estes estudos serão realizados através de testes de citotoxicidade, morte celular (marcação com AnexinaV/lodeto de propídeo), ciclo celular (marcação do iodeto de propídeo), estudo de proteínas envolvidas na apoptose e autofagia, como a razão LC3II/I, beclina 1, p62, Bcl2/Bax e p53 (por immunobloting). Esta ultima metodologia também será utilizada na avaliação da proteína GSK3 total e fosforilada. A diferenciação celular será estudada utilizando anticorpos específicos para células progenitoras e maduras como CD34+ e CD11b, respectivamente por citometria de fluxo. A proliferação celular será avaliada por cultura clonal na presença de fatores de crescimento específicos para a linhagem mielóide como GM-CSF. Além disso, avaliaremos a participação da caspase-3 na morte celular nos grupos estudados. Esperamos, com este trabalho, avançar um pouco mais no conhecimento do impacto da autofagia e da via GSK-3 no tratamento das leucemias objetivando o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GIGLI, RAFAEL; PEREIRA, GUSTAVO J. S.; ANTUNES, FERNANDA; BECHARA, ALEXANDRE; GARCIA, DANIEL M.; SPINDOLA, DANIEL G.; JASIULIONIS, MIRIAN G.; CAIRES, ANTONIO C. F.; SMAILI, SORAYA S.; BINCOLETTO, CLAUDIA. The biphosphinic paladacycle complex induces melanoma cell death through lysosomal-mitochondrial axis modulation and impaired autophagy. EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, v. 107, p. 245-254, JAN 1 2016. (12/51215-4, 10/51647-6)

GRASSO, SILVINA; PEREIRA, GUSTAVO J. S.; PALMEIRA-DOS-SANTOS, CAROLINE; CALGAROTTO, ANDRANA K.; MARTINEZ-LACACI, ISABEL; ANTONIO FERRAGUT, JOSE; SMAILI, SORAYA S.; BINCOLETTO, CLAUDIA. Autophagy regulates Selumetinib (AZD6244) induced-apoptosis in colorectal cancer cells. EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, v. 122, p. 611-618, OCT 21 2016. (12/51215-4)

PALMEIRA-DOS-SANTOS, CAROLINE; PEREIRA, GUSTAVO J. S.; BARBOSA, CHRISTIANO M. V.; JURKIEWICZ, ARON; SMAILI, SORAYA S.; BINCOLETTO, CLAUDIA. Comparative study of autophagy inhibition by 3MA and CQ on Cytarabine-induced death of leukaemia cells. JOURNAL OF CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY, v. 140, n. 6, p. 909-920, JUN 2014. (12/51215-4)

COSTA, MAIRA M.; STILHANO, ROBERTA S.; OLIVEIRA, CARLOS R.; BARBOSA, CHISTIANO M. V.; PEREIRA, GUSTAVO J. S.; PAREDES-GAMERO, EDGAR J.; NAKAIE, CLOVIS R.; SMAILI, SORAYA S.; BINCOLETTO, CLAUDIA. Angiotensin II modulates the murine hematopoietic stem cell and progenitors cocultured with stromal S17 cells. Cell Biology International, v. 45, n. 7, p. 1459-1467, JUL 2021. (12/51215-4)

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BINCOLETTO, C.; BECHARA, A.; PEREIRA, G. J. S.; SANTOS, C. P.; ANTUNES, F.; DA-SILVA, J. PEIXOTO; MULER, M.; GIGLI, R. D.; MONTEFORTE, P. T.; HIRATA, H.; et al. Interplay between apoptosis and autophagy, a challenging puzzle: New perspectives on antitumor chemotherapies. Chemico-Biological Interactions, v. 206, n. 2, p. 279-288, NOV 25 2013. (12/51215-4)