Identificação dos antígenos principais dos venenos das vespas sociais Agelaia pallipes pallipes e Polybia paulista (Hymenoptera, Vespidae)

• Processo: 05/00982-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Mario Sergio Palma
• Beneficiário: Mario Sergio Palma
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Rio Claro. Rio Claro , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas Venenos de origem animal Toxicologia Alérgenos Proteômica Vespas Polybia paulista
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alergia | Analise Proteomica | Imunoquimica | Quimica De Proteinas | Toxinas | Veneno De Vespas | Toxinologia

Resumo

Alguns pacientes alérgicos a veneno de vespas apresentam pesquisa negativa de IgE específica com os extratos comerciais disponíveis (importados de países do Hemisfério Norte), impossibilitando o uso dos mesmos para diagnóstico e terapia de pacientes alérgicos aos venenos de vespas tropicais. Faz-se necessário desenvolver nossos próprios extratos padronizados, para uso em diagnóstico e terapia, baseados nas características dos venenos de vespas de nossa biodiversiade. Este trabalho pretende identificar os componentes alergênicos principais nos venenos das duas espécies de vespas sociais mais abundantes no sudeste do Brasil: Agelaia pallipes pallipes e Polybia paulista, utilizando-se de uma abordagem de análise proteômica. Metodologia: os venenos das duas espécies de vespas sociais serão submetidos à eletroforese bidimensional. Na primeira dimensão utilizamos tiras de gel de 7 cm com gradiente de pH de 3.0 - 10.0, e na segunda SDS-PAGE 15%. Com os géis feitos em duplicata, o primeiro será transferido para membrana de PVDF e incubado com o soro de paciente sensibilizado (diluição 1:5). A imunodetecção foi realizada com anti-IgE humana biotinilada e ECL (Enhanced ChemiLuminescence). No segundo gel, corado com Coomassie, os spots correspondentes às proteínas reconhecidas pela IgE, através do immunoblotting, serão processados e analisados por espectrometria de massa do MALDI-ToF/MS e/ou ESI-MS/MS. A identificação será realizada com o uso de ferramentas de bioinformática proteômica. (AU)

Patente(s) depositada(s) como resultado deste projeto de pesquisa