Avaliação de plasmídeo vacinal contendo o gene da proteína de estresse térmico de 60kDa de Paracoccidioides brasiliensis como terapia contra a paracoccidiodomicose experimental em camundongos

• Processo: 17/01390-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Ademilson Panunto-Castelo
• Beneficiário: Ademilson Panunto-Castelo
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Paracoccidioidomicose Paracoccidioides brasiliensis Chaperonina 60 Vacinas de DNA Estresse térmico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fungus | infection | Terapia | Vacina de DNA | Imunologia Básica e Aplicada

Resumo

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelos fungos Paracoccidioides brasiliensis e P. lutzii. A enfermidade é autóctone da América Latina, sendo o Brasil o país com o maior número de casos. A PCM se manifesta como uma inflamação crônico-granulomatosa, acometendo principalmente os pulmões. A depender de fatores do hospedeiro e do fungo, a PCM pode variar de uma infecção assintomática até doença disseminada grave. A resposta do hospedeiro ao fungo é dependente da efetuação de resposta imunológica celular, sendo a preponderância inicial do padrão de resposta de linfócitos T helper 1 (Th1), com produção de interferon (IFN-) ³ e fator de necrose tumoral (TNF-) ±, responsável pela proteção. Já a resposta Th2, com produção de interleucina (IL-) 4, IL-5, IL-10, inviabiliza o controle do crescimento fúngico, gerando doença ativa e disseminação do fungo pelo organismo. As proteínas de estresse (Hsp) são moléculas que desempenham uma série de papéis fisiológicos dentro da célula, dentre os quais destaca-se o processo de enovelamento correto das proteínas recém sintetizadas. Assim, quando as células são submetidas a eventos estressores, por exemplo, estresse térmico, infecção, radiação, ocorre um aumento da produção dessas Hsp. Embora ainda não se tenha determinado a localização exata da Hsp60 em Paracoccidioides spp., sabe-se que em mamíferos é localizada dentro das mitocôndrias. Quando liberadas pelas células de mamíferos, Hsp60 é reconhecida pelo sistema imunológico como um sinal de lesão celular, o que leva à liberação de mediadores inflamatórios, com apresentação dessas moléculas pelas células apresentadoras de antígeno. A Hsp60 parece ser importante no curso da PCM, tendo em vista que os soros de pacientes infectados com Paracoccidioides spp. reconhecem essa proteína. Recentemente, nosso grupo mostrou que o tratamento de animais infectados com Hsp60 induzia ao aumento da carga fúngica e do quadro inflamatório. A fim de avaliar se outra forma de apresentar a Hsp60 ao sistema imunológico poderia alterar a resposta e ser benéfica na PCM experimental, neste estudo buscaremos outra forma de indução de resposta imunológica contra Hsp60, qual seja, o uso de plasmídeos contendo o gene de Hsp60 de P. brasiliensis. Para tanto, animais serão infectados com leveduras do fungo e, posteriormente, será submetido ao tratamento com pVAX contendo ou não o inserto do gene Hsp60, 20 dias após a infecção. Para verificar se os tratamentos foram benéficos, animais-teste e controles serão analisados quanto a carga fúngica, quadro inflamatório e produção de citocinas. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

COSTA, MARCELO VIEIRA; LANDGRAF, TAISE NATALI; CORREA, PRISCILA C.; LEMOS SOUZA, IGOR EMILIANO; FERNANDES, FABRICIO FREITAS; PANUNTO-CASTELO, ADEMILSON. Quantitation of pulmonary fungal burden in Paracoccidioides brasiliensis-infected mice by real-time PCR. Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, v. 61, 2019. (13/12278-3, 17/01390-8)

SOUZA, IGOR EMILIANO L.; FERNANDES, FABRICIO F.; SCHIAVONI, MARIA CRISTINA L.; SILVA, CELIO L.; PANUNTO-CASTELO, ADEMILSON. Therapeutic effect of DNA vaccine encoding the 60-kDa-heat shock protein from Paracoccidoides brasiliensis on experimental paracoccidioidomycosis in mice. Vaccine, v. 37, n. 37, p. 5607-5613, SEP 3 2019. (17/01390-8)

FABRÍCIO FREITAS FERNANDES; NAYLA S. PITANGUI; GABRIELA PERON; CLARISSA X. R. VALIM; VÍVIAN M. MAZUCATO; ALINE F. OLIVEIRA; THIAGO A. DA SILVA; MARIA-CRISTINA ROQUE-BARREIRA; ADEMILSON PANUNTO-CASTELO. Expression of Hsp60 and its cell location in Paracoccidioides brasiliensis. Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, v. 62, 2020-05-11. (16/00629-4, 17/01390-8)

CORREA, PRISCILA C.; FERNANDES, FABRICIO F.; COSTA, V, MARCELO; LANDGRAF, TAISE N.; PANUNTO-CASTELO, ADEMILSON. iochemical characterization and analysis of gene expression of an alpha-mannosidase secreted by Paracoccidioides brasiliensi. Medical Mycology, v. 60, n. 2, FEB 2 2022. (17/01390-8)