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Proteinas-gpi de paracoccidioides brasiliensis: clonagem pelo sistema gateway, expressao e avaliacao de seu papel protetor em infeccao experimental

Resumo

A paracoccidioidiodomicose, cujo agente é o fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis, representa uma importante infecção endêmica no Brasil e América Latina. O recente sequenciamento de seu transcriptoma e genoma e o desenvolvimento de ferramentas de genética molecular abrem perspectivas de estudos funcionais em escala global para a o entendimento de sua patogenicidade. Resultados preliminares de bioinformática a partir da análise do transcriptoma permitiram a identificação de 16 proteinas-GPI com homologia ao fungo patogênico Histoplasma capsulatum, muitas delas de função desconhecida. As proteinas-GPI constituem a principal classe de proteínas de parede em ascomicetos e podem ter um importante papel na patogenicidade (aderência ao tecido hospedeiro por ex.). Os objetivos deste projeto são: a) clonar todas os genes codificadores de proteina-GPI de P. brasiliensis pelo sistema Gateway b) avaliar por real-time PCR o nível de expressão destes genes na fase patogênica leveduriforme c) expressar as proteínas em E. coli, purificá-las e obter anticorpos policionais específicos d) avaliar seu potencial papel imunogênico e protetor em modelo de infecção em 1 camundongos. O conjunto de plasmideos Gateway que carregam as seqüências codificadores de proteina-GPI representará uma importante fonte de reagentes para estudos futuros de função. Por exemplo eles poderão ser transferidos facilmente para outros vetores de expressão heteróloga (Pichia pastoris por ex.) ou ainda vetores de vacina de DNA ou RN A antisense. O projeto pretende portanto contribuir para o desenvolvimento de reagentes úteis na prevenção e tratamento desta importante micose. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
RESENDE VALIM, CLARISSA XAVIER; MARCELINO DA SILVA, ELAINE ZAYAS; ASSIS, MARIANA APRIGIO; FERNANDES, FABRICIO FREITAS; RODRIGUES COELHO, PAULO SERGIO; OLIVER, CONSTANCE; JAMUR, MARIA CELIA. rPbPga1 from Paracoccidioides brasiliensis Activates Mast Cells and Macrophages via NFkB. PLoS Neglected Tropical Diseases, v. 9, n. 8 AUG 2015. Citações Web of Science: 6.
VALIM, CLARISSA X. R.; BASSO, JR., LUIZ ROBERTO; DOS REIS ALMEIDA, FAUSTO B.; REIS, THAILA FERNANDA; LIMA DAMASIO, ANDRE RICARDO; ARRUDA, LUISA KARLA; MARTINEZ, ROBERTO; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA; OLIVER, CONSTANCE; JAMUR, MARIA CELIA; RODRIGUES COELHO, PAULO SERGIO. Characterization of PbPga1, an Antigenic GPI-Protein in the Pathogenic Fungus Paracoccidioides brasiliensis. PLoS One, v. 7, n. 9 SEP 14 2012. Citações Web of Science: 6.
REIS, T. F.; BASSO, JR., L. R.; OLIVEIRA, R. R.; COELHO, P. S. R. Septin localization in the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis. YEAST, v. 28, n. 12, p. 843-854, 2011. Citações Web of Science: 2.

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