Proteinas-gpi de paracoccidioides brasiliensis: clonagem pelo sistema gateway, expressao e avaliacao de seu papel protetor em infeccao experimental

• Processo: 08/55831-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Paulo Sergio Rodrigues Coelho
• Beneficiário: Paulo Sergio Rodrigues Coelho
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Paracoccidioides brasiliensis Histoplasma Vacinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Gateway | Histoplasma Capsulatum | Paracoccidioides Brasiliensis | Parece Celular | Proteina-Gpi | Vacina

Resumo

A paracoccidioidiodomicose, cujo agente é o fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis, representa uma importante infecção endêmica no Brasil e América Latina. O recente sequenciamento de seu transcriptoma e genoma e o desenvolvimento de ferramentas de genética molecular abrem perspectivas de estudos funcionais em escala global para a o entendimento de sua patogenicidade. Resultados preliminares de bioinformática a partir da análise do transcriptoma permitiram a identificação de 16 proteinas-GPI com homologia ao fungo patogênico Histoplasma capsulatum, muitas delas de função desconhecida. As proteinas-GPI constituem a principal classe de proteínas de parede em ascomicetos e podem ter um importante papel na patogenicidade (aderência ao tecido hospedeiro por ex.). Os objetivos deste projeto são: a) clonar todas os genes codificadores de proteina-GPI de P. brasiliensis pelo sistema Gateway b) avaliar por real-time PCR o nível de expressão destes genes na fase patogênica leveduriforme c) expressar as proteínas em E. coli, purificá-las e obter anticorpos policionais específicos d) avaliar seu potencial papel imunogênico e protetor em modelo de infecção em 1 camundongos. O conjunto de plasmideos Gateway que carregam as seqüências codificadores de proteina-GPI representará uma importante fonte de reagentes para estudos futuros de função. Por exemplo eles poderão ser transferidos facilmente para outros vetores de expressão heteróloga (Pichia pastoris por ex.) ou ainda vetores de vacina de DNA ou RN A antisense. O projeto pretende portanto contribuir para o desenvolvimento de reagentes úteis na prevenção e tratamento desta importante micose. (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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REIS, T. F.; BASSO, JR., L. R.; OLIVEIRA, R. R.; COELHO, P. S. R.. Septin localization in the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis. YEAST, v. 28, n. 12, p. 843-854, 2011. (03/01440-2, 08/55831-6)