Participação dos macrófagos M1 e M2 na gênese, desenvolvimento e tratamento da lesão periapical

• Processo: 16/24900-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontopediatria
• Pesquisador responsável: Paulo Nelson Filho
• Beneficiário: Paulo Nelson Filho
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carlos Arterio Sorgi ; Léa Assed Bezerra da Silva ; Lúcia Helena Faccioli ; Raquel Assed Bezerra da Silva
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/17068-8 - Participação dos macrófagos M1 e M2 na gênese, desenvolvimento e tratamento da lesão periapical, BP.TT
• Assunto(s): Imuno-histoquímica Cultura de células Reação em cadeia por polimerase (PCR) Lesões periapicais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cultura de células | imunohistoquimica | Lesão Periapical | Macrófagos M1 | macrófagos M2 | Pcr | Odontopediatria

Resumo

Os macrófagos são células fagocíticas, conhecidas por apresentarem uma considerável heterogeneidade em termos morfológicos, funcionais e de expressão de marcadores. Dependendo do microambiente ao qual os monócitos, suas células progenitoras, estão expostos, há definição do seu fenótipo em "classicamente ativado" (macrófago M1) ou "alternativamente ativado" (macrófago M2a, M2b e M2c). Os macrófagos M1 promovem um ambiente altamente microbicida e têm papel na mediação da destruição de patógenos e células tumorais. Já os macrófagos M2 desempenham um papel central nas respostas frente às infestações parasitárias, remodelação tecidual, angiogênese e doenças alérgicas. Assim, o objetivo desse estudo será avaliar a participação dos macrófagos M1 e M2 na gênese e no desenvolvimento de lesões periapicais induzidas em dentes de camundongos, por meio de análises histopatológicas, imunohistoquímicas e de expressão gênica. Além disso, em cultura de células, será avaliada a polarização dos macrófagos, quando em contato com diferentes materiais utilizados para o tratamento da lesão periapical. Um total de 195 camundongos C57BL/6 serão divididos em grupos controle (dentes hígidos; n=75 animais) e experimental (dentes com lesão periapical experimentalmente induzida; n=120 animais). Decorridos os períodos de 2, 7, 14, 21 e 42 dias, animais controles e experimentais serão eutanasiados e os espécimes submetidos ao processamento histotécnico, para a descrição das características dos tecidos apicais e periapicais e para análise morfológica de macrófagos em cortes corados com HE, sob microscopia convencional, além da imunomarcação para a identificação de macrófagos. Será realizado, também, o qRT-PCR para análise da expressão gênica (genes Cxcl10, CxCL9, iNos2, Arg1, Ym1, Fizz1 e MRC1) e ensaio Luminex®, para a identificação de macrófagos M1 e M2 e identificação de diferentes citocinas (GM-CSF, IFN-³, IL-4, IL-13, IL- 10, IL-6, IL-1² e TNF-±). Em cultura de células de macrófagos derivados da medula óssea desses animais, será realizada a avaliação da viabilidade celular, dosagem de NO, análise da expressão gênica por meio do qRT-PCR (genes Cxcl10, CxCL9, iNos2, Arg1 , Ym1, Fizz1 e MRC1) e quantificação de citocinas pelo Luminex® (GM-CSF, IFN-³, IL-4, IL-13, IL- 10, IL-6, IL-1² e TNF-±), após exposição a cinco materiais utilizados no tratamento da lesão periapical (AH PlusTM, Sealapex XpressTM, EndosequenceTM, BioRootTM, EndomethasoneTM e pasta à base de Hidróxido de cálcio). Os dados serão analisados com o auxílio do Graph Pad Prism 5, utilizando os testes adequados para cada uma das avaliações. O nível de significância adotado será de 5%. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

RAQUEL ASSED BEZERRA DA SILVA; LÉA ASSED BEZERRA DA SILVA; EDSON ALVES GABRIEL-JUNIOR; CARLOS ARTERIO SORGI; LÚCIA HELENA FACCIOLI; VIVIAN VICENTIN MASSONI; PAULO NELSON-FILHO; CAROLINA MASCHIETTO PUCINELLI. M1 and M2 macrophages phenotypes modulation after stimuli with materials used in endodontic treatment. Brazilian Dental Journal, v. 32, n. 3, p. 32-43, 2021-11-08. (16/24900-9)