Desenvolvimento de um sistema de expressão e excreção de proteínas heterólogas na levedura Kluyveromyces marxianus

• Processo: 05/55835-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2005
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2009
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Andreas Karoly Gombert
• Beneficiário: Saul Nitsche Rocha
• Instituição Sede: Escola Politécnica (EP). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Kluyveromyces Leveduras Processos bioquímicos Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Kluyveromyces Marxianus | Leveduras Nao Convencionais | Processos Bioquimicos | Proteinas Heterologas

Resumo

O objetivo deste projeto de pesquisa é a de desenvolver um sistema eficiente de expressão de proteínas heterólogas na levedura Kluyveromyces marxianus. Para tal, haverá três etapas principais. Na primeira, selecionar-se-ão, dentre algumas linhagens de K. marxianus, duas que apresentem maior produção de inulinase extracelular, como forma de avaliação da capacidade de expressar e secretar proteínas heterólogas. Na segunda etapa, ocorrerá a construção do sistema genético de expressão, inserção do DNA plasmidial na levedura e medição da expressão da proteína heteróloga. As proteínas a serem testadas serão a enzima glicose oxidase (GOD) de Aspergillus niger e a proteína humana interferon alfa-2a. Na última etapa, serão realizados estudos em biorreator para que seja estudada a produção dessas proteínas em um sistema que simule a larga escala e também será medido o padrão de glicosilação dos peptídeos para se verificar como é o padrão de glicosilação em Kluyveromyces marxianus e como isto se compara com outras leveduras. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROCHA, SAUL NITSCHE; ABRAHAO-NETO, JOSE; GOMBERT, ANDREAS KAROLY. Physiological diversity within the kluyveromyces marxianus species. ANTONIE VAN LEEUWENHOEK INTERNATIONAL JOURNAL OF GENERAL AND MOLECULAR MICROBIOLOGY, v. 100, n. 4, p. 619-630, NOV 2011. (05/55835-3, 01/13615-6)

ROCHA, SAUL NITSCHE; ABRAHAO-NETO, JOSE; CERDAN, MARIA ESPERANZA; GOMBERT, ANDREAS KAROLY; GONZALEZ-SISO, MARIA ISABEL. Heterologous expression of a thermophilic esterase in Kluyveromyces yeasts. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 89, n. 2, p. 375-385, JAN 2011. (05/55835-3, 01/13615-6)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ROCHA, Saul Nitsche. Expressão e secreção de proteínas heterólogas em leveduras do gênero Kluyveromyces.. 2009. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Escola Politécnica (EP/BC) São Paulo.