Efeito dos ácidos oleico, linoleico e palmítico na proliferação celular e expressão de a-enolase e FBP (Far upstream element-binding protein) em fibroblastos murinos: possível aplicação no processo de cicatrização

• Processo: 09/03488-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Rui Curi
• Beneficiário: Juliana Magdalon
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cicatrização Ácidos graxos Fibroblastos Inflamação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácido graxo | a-enolase | cicatrização | fibroblasto | Inflamação | remodelamento de tecido | Cicatrização e remodelamento

Resumo

Fibroblastos são protagonistas da fase de proliferação e de deposição da matriz extracelular no processo de cicatrização de feridas. Agem através da liberação de fatores responsáveis pela fibroplasia, deposição de matriz extracelular e angiogênese. Em estudos do grupo (in vivo e in vitro) foi observado que os ácidos graxos afetam as fases inflamatórias e de remodelamento do tecido sendo potencializadores do processo de reparo tecidual. Recentemente, verificamos que os ácidos oleico, linoleico e g-linolênico estimulam a produção de espécies reativas de oxigênio em fibroblastos. Adicionalmente, estudos preliminares in vitro indicam uma possível modulação dos fibroblastos pelos ácidos oleico, linoleico e palmítico na expressão de proteínas (IL-6, TNF-a, PPAR-b) e na proliferação celular. In vivo, o tratamento de feridas com ácidos graxos diminui a camada de células necrosadas ao redor do ferimento e aumenta a expressão local de VEGF-a e PPAR-b. Realizamos a análise proteômica por eletroforese em gel bidimensional de proteínas moduladas em fibroblastos tratados com os ácidos oleico, linoleico e palmítico. Dentre as proteínas identificadas, a ±-enolase e a Far upstream element binding protein 1 (FBP1) estão diretamente envolvidas no processo de cicatrização, atuando na migração e proliferação dos fibroblastos e no remodelamento do tecido. A a-enolase participa formando plasmina e degradando componentes da matriz extracelular. A FBP modula a expressão de c-myc, estando envolvida na proliferação de células. Neste sentido, estudaremos o efeito do tratamento de fibroblastos murinos com os ácidos oleico, linoleico e palmítico na proliferação celular e expressão de a-enolase e FBP; verificaremos o mecanismo de sinalização envolvido, correlacionando-o ao processo de cicatrização, principalmente em relação à síntese e degradação de colágeno. Os ensaios de proliferação celular serão realizados pelas técnicas de incorporação de timidina e curva de crescimento. A expressão de a-enolase, FBP e c-myc será verificada por Western Blot e qPCR. A análise da expressão de ±-enolase na superfície celular será realizada por citometria de fluxo e a atividade de plasmina e degradação de colágeno por espectrofotometria e contagem de radioatividade, respectivamente. Também será analisada a contração de uma matriz de colágeno. A realização do presente estudo pode levar à utilização de ácidos graxos como alvo terapêutico no processo de cicatrização.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MAGDALON, Juliana. Efeitos dos tratamentos com os ácidos oleico ou linoleico in vitro e in vivo sobre a produção de mediadores inflamatórios por macrófagos.. 2011. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.