Caracterização da resposta SOS de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni

• Processo: 09/06962-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Paulo Lee Ho
• Beneficiário: Luciane Schons da Fonseca
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 04/09948-8 - Clonagem e expressão de proteínas com potencial uso vacinal e em diagnóstico identificadas do genoma da bactéria Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, AP.TEM
• Assunto(s): Leptospirose Promotores
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: leptospirose | Promotores | Biologia Molecular

Resumo

A leptospirose, uma zoonose difundida por todo o mundo, possui um alto grau de variação sintomática, podendo se manifestar de forma subclínica ou progredindo para uma infecção generalizada potencialmente fatal. Os principais transmissores da doença em ambientes urbanos são roedores, e a insuficiência dos serviços de saneamento dos trópicos, somada com as freqüentes inundações, faz com que nessa zona concentre-se a maior incidência da doença. Para investigar os genes regulados pelos diversos parâmetros ambientais que L. interrogans pode enfrentar ao longo do ciclo da doença, e das respectivas seqüências responsáveis por sua regulação, será feita uma biblioteca de fusões genômicas à montante do gene repórter lacZ sem seu promotor. Os plasmídeos contendo essas construções serão utilizados para tranformar E. coli, e os clones resultantes serão triados em busca de seqüências de L. interrogans que respondam a diferentes condições ambientais, como níveis de osmolaridade, temperatura e pH, entre outras. A identificação das mudanças transcricionais será feita através da medição da atividade da ²-galactosidase resultante. As seqüências que responderem às condições testadas serão caracterizadas, através de RT-PCR quantitativo, análise de deleções e de primer extension. Essas informações poderão responder questões importantes em relação à patogenicidade de L. interrogans. As seqüências responsivas codificantes controladas por estes promotores que possam ser considerados potenciais antígenos vacinais serão avaliadas quanto a sua imunogenicidade e capacidade de induzir resposta imune protetora.