Análise molecular e funcional de genes formadores e reguladores do colágeno tipo i em pacientes com osteogênese imperfeita

• Processo: 09/11624-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2010
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Lília Freire Rodrigues de Souza Li
• Beneficiário: Marcus Vinícius Costa Pedroni
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Osteogênese imperfeita Genética médica Colágeno Mutação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: colageno | Crtap | Leprei | mutação | osteogenese imperfeita | Genética Médica

Resumo

A Osteogênese Imperfeita (OI) é um distúrbio genético caracterizado por baixa massa e fragilidade óssea, e outras manifestações do tecido conjuntivo, decorrente de defeitos qualitativos ou quantitativos do colágeno tipo I. Está associada a mutações nos genes COL1A1 e COL1A2 que codificam respectivamente as cadeias pro±1-(I) e pro±-2(I) formadoras da molécula do colágeno tipo I, e mais raramente e mutações nos genes CRTAP e LEPREI envolvidos na hidroxilação do resíduo de prolina 986. Geralmente apresenta padrão hereditário autossômico dominante, porém pode ocorrer herança autossômica recessiva. A OI manifesta-se através de diferentes fenótipos, segundo a classificação de Sillence et al. Este projeto de pesquisa tem por objetivo realizar a análise molecular e estrutural dos genes do colágeno tipo I, e avaliar sua funcionalidade em famílias brasileiras portadoras de OI, com diferentes formas clínicas. Será realizada biópsia da pele dos pacientes e cultura primária de fibroblastos. Desta cultura será extraído RNA total e DNA genômico, que serão usados como molde para transcrição reversa e reação em cadeia de polimerase dos genes COL1A1 e COL1A2. A análise das mutações serão realizadas através de dHPLC e confirmado através de sequenciamento de cDNA. Sua expressão gênica e quantificação serão determinadas pela técnica de Real Time PCR, e por Western Blot. Também investigaremos mutações nos genes CRTAP e LEPREI, caso não seja encontrada mutações nos genes do colágeno. Devido à heterogeneidade dos quadros apresentados, é necessária a melhor definição do genótipo em nossa população.