Emprego de selante de fibrina combinado com células tronco mononucleares de medula óssea no reparo de raízes motoras após a avulsão na interface do SNC/SNP

• Processo: 10/00729-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2010
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira
• Beneficiário: Roberta Barbizan Petinari
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 09/50809-5 - Inflamação e resposta imune em obesidade, AP.TEM
• Assunto(s): Reimplante Adesivo tecidual de fibrina Plasticidade neuronal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Avulsão | células tronco mononucleares | cola de fibrina | Reimplante | neuroplasticidade

Resumo

A impossibilidade de reparo eficiente de lesões no SNC é um importante problema médico. Diferentes modelos experimentais de lesão axonal têm sido propostos com a finalidade de investigar a neuroproteção/degeneração e a plasticidade sináptica em motoneurônios, bem como testar o potencial de diferentes tratamentos. Neste contexto, a avulsão de raízes motoras tem se mostrado um modelo experimental reprodutível de degeneração de neurônios motores em ratos, ocorrendo morte de cerca de 80% dos motoneurônios duas semanas após a lesão. No entanto, os motoneurônios que sobrevivem a avulsão têm potencial regenerativo após o reimplante de raízes nervosas, podendo servir como um modelo de regeneração no sistema nervoso central (SNC). Contudo, na maioria das vezes, o reimplante das raízes não é suficiente para se obter um retorno funcional, uma vez que a lesão causa grande perda neuronal. Há, portanto, necessidade do desenvolvimento de estratégias para diminuição da morte neuronal pós-lesão e direcionamento dos neuritos para seu alvo correto. O emprego de selante de fibrina pode auxiliar nesse processo, porém ainda são necessários estudos acerca de suas interações com células do sistema nervoso e neuritos em crescimento. O selante de fibrina derivado de serinoprotease do veneno de serpente e criopreciptado animal não utiliza sangue humano em sua constituição. Por ter ação "drug delivery", sua aplicação possibilita sua associação com células tronco mononucleares de medula óssea (CTMMO), tendo-se em vista que recentes estudos mostraram resultados promissores em relação ao implante de células tronco para tratamento de doenças e lesões do SNC, atribuindo-se tal melhora funcional à produção de fatores tróficos. Esse trabalho visa contribuir para o futuro emprego clínico desta abordagem terapêutica, preenchendo uma importante lacuna nos procedimentos reparativos após a avulsão. Neste sentido, investigaremos a eficácia do selante de fibrina juntamente com o efeito neuroprotetor de CTMMO de animais Lewis-GFP, após avulsão e reimplante de raízes motoras. Os animais serão divididos nos seguintes grupos experimentais: Grupo 1- será injetado DMEM (meio de cultura) na interface da substância branca e cinzenta, na região da lâmina IX e as raízes (L4, L5 e L6) serão reimplantadas com selante; Grupo 2- CTMMO serão injetadas na interface da substância branca e cinzenta, na região da lâmina IX e as raízes serão reimplantadas com selante; Grupo 3- a reimplantação será apenas com selante, sem a utilização de células tronco; Grupo 4- as raízes avulsionadas serão reimplantadas com selante de fibrina associado às CTMMO; Grupo 5- será realizada a avulsão e as raízes não serão reimplantadas. Serão utilizadas técnicas de citometria de fluxo e imunocitoquímica para caracterização das CTMMO; microscopia eletrônica de transmissão para análise da plasticidade sináptica e imunoistoquímica para verificação da gliose reativa e determinação da produção local de fatores tróficos in vivo pelas CTMMO. A microscopia de luz será empregada para a investigação da sobrevivência neuronal e testes motores serão realizados para o cálculo do índice funcional do nervo isquiático.

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS V.; BARRAVIERA, BENEDITO; FERREIRA, JR., RUI S.; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R.. Influence of Delivery Method on Neuroprotection by Bone Marrow Mononuclear Cell Therapy following Ventral Root Reimplantation with Fibrin Sealant. PLoS One, v. 9, n. 8, AUG 26 2014. (10/00729-2)

BISCOLA, NATALIA PERUSSI; CARTAROZZI, LUCIANA POLITTI; ULIAN-BENITEZ, SUZANA; BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS VIDIGAL; SPEJO, ALINE BARROSO; FERREIRA, JR., RUI SEABRA; BARRAVIERA, BENEDITO; RODRIGUES OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, n. 1, MAR 14 2017. (12/20456-6, 12/08101-8, 14/06892-3, 12/22750-9, 12/02689-3, 11/23377-7, 11/02889-0, 13/04409-0, 09/53846-9, 14/11405-4, 10/00729-2, 13/23030-2, 12/13514-0)

NATALIA PERUSSI BISCOLA; LUCIANA POLITTI CARTAROZZI; SUZANA ULIAN-BENITEZ; ROBERTA BARBIZAN; MATEUS VIDIGAL CASTRO; ALINE BARROSO SPEJO; RUI SEABRA FERREIRA JR.; BENEDITO BARRAVIERA; ALEXANDRE LEITE RODRIGUES OLIVEIRA. Multiple uses of fibrin sealant for nervous system treatment following injury and disease. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 23, 2017-04-27. (13/23030-2, 11/23377-7, 12/02689-3, 12/20456-6, 14/06892-3, 14/11405-4, 11/02889-0, 13/04409-0, 12/08101-8, 09/53846-9, 12/22750-9, 12/13514-0, 10/00729-2)

BARBIZAN, ROBERTA; CASTRO, MATEUS V.; RODRIGUES, ANTONIO C.; BARRAVIERA, BENEDITO; FERREIRA, RUI S.; OLIVEIRA, ALEXANDRE L. R.. Motor Recovery and Synaptic Preservation after Ventral Root Avulsion and Repair with a Fibrin Sealant Derived from Snake Venom. PLoS One, v. 8, n. 5, MAY 7 2013. (10/00729-2, 13/06574-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PETINARI, Roberta Barbizan. Emprego do selante de fibrina combinado com células mononucleares de medula óssea no reparo de raízes motoras após avulsão na interface do sistema nervoso central e periférico. 2014. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.