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Coxiella burnetii: o papel das proteínas LAMPs e LIMPs na colonização de células nocautes para essas proteínas

Processo: 10/02004-5
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Parasitologia
Pesquisador responsável:Renato Arruda Mortara
Beneficiário:Viviane Martinelli Gonçalves
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Lisossomos   Sinalização intracelular   Vacúolos   Coxiella burnetii
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Coxiella burnetii | Lamp | Limp | Lisossomos | tráfego intracelular | vacúolos | Interação parasita/célula hospedeira

Resumo

A internalização, estabilização e multiplicação intracelular de bactérias (e outros patógenos) pode ser iniciada e/ou controlada por moléculas associadas ao patógeno, que podem modular vias de sinalização pré-existentes na célula hospedeira. Já foi visto que os vacúolos parasitóforos de C. burnetii, bactéria intracelular obrigatória e agente causador da Febre Q, apresentam características de lisossomo secundário e grande capacidade de fusogenicidade com vesículas e outros vacúolos da via endossomal. Ocorre fusão, por exemplo, entre vacúolos contendo partículas inertes como zymosan e micro-esferas de látex. Foi visto também a fusão com vacúolos de alguns parasitas intracelulares, como Trypanosoma cruzi em ensaios de coinfeção, formando fagossomos quiméricos com a co-localização dos parasitas. Após a internalização, os vacúolos que abrigam C. burnetii seguem a via de maturação convencional que termina pela fusão com lisossomos. Quando maduro, a membrana desse vacúolo apresenta uma variedade de proteínas e também marcadores de autofagossomos, sugerindo a sua interação com diversas vesículas e componentes celulares, especialmente com lisossomos. A utilização de células nocautes para algumas glicoproteínas lisossomais (LAMP-1, LAMP-2, LIMP-1 e LIMP-2) torna-se uma ferramenta poderosa para verificar a importância/função dessas proteínas nos processos de colonização celular, desenvolvimento da bactéria, tráfego e fusão/interação dos vacúolos de Coxiella burnetii e maturação dos mesmos, levando em consideração que seus vacúolos parasitóforos apresentam marcadores lisossomais. Esse projeto tem como objetivos: Verificar a influência das proteínas lisossomais LAMP-1, LAMP-2, LIMP-1/CD63 e LIMP-2/LGP85 na colonização intracelular pela bactéria Coxiella burnetii; elucidar o papel e importância dessas mesmas proteínas no tráfego intracelular, fusogenicidade e desenvolvimento dos vacúolos de Coxiella burnetii em células knockout para essas proteínas e comparar a fusogenicidade dos vacúolos parasitóforos de Coxiella burnetii nessas células knockout, com partículas inertes e possivelmente com o de outros parasitas.

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