Avaliação das vias de sinalização de danos e indução de citocinas inflamatórias na presença da toxina BthTX-I isolada da peçonha de Bothrops jararacussu.

• Processo: 10/03243-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
• Pesquisador responsável: Suely Vilela
• Beneficiário: Cássio Prinholato da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Necrose Fragmentação do DNA Citocinas Toxicologia Apoptose Ciclo celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptose | BthTX-I | ciclo celular | citocinas | Fragmentação de DNA | necrose | Toxinologia

Resumo

Avanços nos estudos relacionados à atividade de toxinas animais em diferentes mecanismos biológicos têm contribuído de forma significativa para o desenvolvimento de novos fármacos, bem como na adoção de estratégias terapêuticas mais eficazes em várias doenças humanas. No entanto, apesar de as bases moleculares da ação destas toxinas ainda serem pouco conhecidas, é sabido que os efeitos delas comprometem o ciclo de determinadas atividades biológicas como apoptose, ciclo celular, inflamação, necrose tecidual, requerendo assim estudos mais aprofundados. Tendo em vista estas informações, o presente projeto tem como objetivo investigar a ação da toxina BthTX-I, purificada da peçonha de Bothrops jararacussu, nas linhagens tumorais humanas HL-60 (leucemia promielocitica aguda) e HEPG2 (hepatocarcinoma humano) e animais B16F10 (melanoma murino) e PC12 (tumor de glândula adrenal). Para tanto, utilizaremos parâmetros de análise de indução de células apoptóticas por citometria de fluxo e fragmentação de DNA, além da análise da atuação dessa toxina sobre o ciclo celular. Em sequência, serão verificadas as vias de atuação da BthTX-I frente aos estudos de expressão gênica, caracterizando as vias de apoptose mediadas pelos genes pró-apoptóticos TP53 e BAX e o gene anti-apoptótico Bcl-2, utilizando a metodologia de PCR em tempo real. Em outra abordagem, será avaliado o potencial imunológico dessa proteina na indução de citocinas inflamatórias e de promoção tumoral (TNF-± e IL-8) pelo metodo de ELISA nos sobrenadantes das culturas das celulas acima mencionadas submetidas ao tratamento com diferentes concentrações de BthTX-I. Os dados gerados neste trabalho contribuirão para melhor compreensão dos efeitos da ação desta toxina, fornecendo assim, ferramentas importantes para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais direcionadas, bem como a possibilidade de descoberta de um novo fármaco.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SILVA, Cássio Prinholato da. Avaliação das vias de sinalização de danos e indução de citocinas inflamatórias na presença da toxina BthTX-I, isolada da peçonha de Bothrops jararacussu. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.