Caracterização de lipoproteínas de Leptospira interrogans expressas em Escherichia coli

• Processo: 10/51115-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Rosane de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Lipoproteínas Escherichia coli Leptospira interrogans Leptospirose Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leptospira Interogans | Leptospirose | Lipoproteinas

Resumo

Leptospirose é uma zoonose altamente disseminada causada por espécies patogênicas do gênero Leptospira. Os roedores são os principais reservatórios da doença nos centros urbanos. Anualmente, são relatados a Fundação Nacional de Saúde cerca de 5000 casos, os quais ocorrem como surtos epidêmicos nas épocas de chuva. O desenvolvimento de uma vacina é critico, uma vez que a contenção da proliferação de roedores é pouco viável. Buscando obter proteínas antigênicas e conservadas nos diversos sorovares de Leptospira interrogans, estudos atuais têm buscado caracterizar e identificar as proteínas de superfície capazes de induzir atividade imunogênica no hospedeiro. O estudo e caracterização de proteínas envolvidas na patogenicidade de L. interrogans, como as lipoproteínas, deverão fornecer dados importantes para o conhecimento dos mecanismos de infecção desta bactéria e servir como base para o desenvolvimento futuro de uma vacina contra a Leptospirose. Sendo assim, o presente projeto propõe clonar e expressar 3 proteínas da classe das lipoproteínas. Os genes selecionados, LIC12238, LIC12880 e LIC10258, codificam preditas proteínas expostas e/ou associadas à membrana externa. Estes genes serão clonados em vetor de expressão de E. coli, as proteínas recombinantes serão purificadas e inoculadas em camundongos para obtenção de soros imunes. Estes soros serão utilizados como sonda para avaliar o reconhecimento dos anticorpos por proteínas do extrato total de Leptospira spp. de diferentes sorovares para estudos de conservação. As proteínas presentes em diferentes leptospiras patogênicas serão avaliadas quanto à reatividade com anticorpos em soros de pacientes diagnosticados com a doença. Será estudada a ligação das proteínas recombinantes obtidas com componentes da matriz extracelular; com componentes do sistema complemento humano, tal como o fator H, e com o plasminogênio a fim de avaliarmos o envolvimento dessas proteínas no processo de adesão e colonização dos tecidos do hospedeiro por L. interrogans. A atividade de imunoproteção em modelo animal também será analisada para sabermos se estas proteínas são interessantes para comporem uma nova vacina contra Leptospirose. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

OLIVEIRA, Rosane de. Caracterização de lipoproteínas de Leptospira interrogans expressas em Escherichia coli.. 2013. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.