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Identificação de Áreas Neurogênicas do sistema Nervoso Central de Guinea Pigs (Cavia Porcellus): cultivo, caracterização e diferenciação de Precursores Neurais

Processo: 10/11008-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2010
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
Área de conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária
Pesquisador responsável:Maria Angelica Miglino
Beneficiário:Erika Toledo da Fonseca
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Caracterização in vitro | célula tronco neural | Guinea pig | Zona subventricular | Céula tronco

Resumo

O sistema nervoso central (SNC) dos mamíferos é extremamente complexo e possui uma capacidade muito limitada de se recuperar após uma lesão. Essas características tem dificultado o sucesso dos tratamentos para doenças e desordens neurológicas. Um grande passo na busca de alternativas para o tratamento farmacológico de diversas patologias que afetam o SNC foi a descoberta de que células provenientes de certas regiões neurais eram passíveis de serem isoladas e cultivadas in vitro e que eventualmente geravam neurônios. À partir daí, estudos intensivos tem sido realizados no sentido de se isolar e caracterizar células tronco (CT) neurais na busca da aplicabilidade no tratamento de doenças como a esclerose múltipla, doença de Parkinson e lesões diversas no tecido nervoso. Assim, o presente trabalho visa identificar e caracterizar os precursores neurais no encéfalo de guinea pigs (Cavia Porcellus). Para isso, células provenientes da região subventricular do encéfalo serão isoladas e cultivadas na forma de neurosferas e posteriormente diferenciadas através da inclusão de BNDF (brain-derived neurotrofic factor) e GDNF (glial-derived neurotrofic factor) ao meio de cultivo. As culturas serão identificadas por meio de imunocitoquímica/imunofluorescência utilizando-se anticorpos que identificam as proteínas NESTIN, GFAP e ²-III-tubulina: marcador de células tronco, células da glia e neurônios respectivamente. Será realizada também citometria de fluxo, para análise das populações celulares, e a viabilidade celular pelo método colorimétrico MTT que será feita por meio de quantificações da absorbância em leitor de ELISA. A funcionalidade dos neurônios gerados será avaliada pela alteração intracelular nas concentrações de cálcio. Com a execução deste projeto, pretende-se somar conhecimentos na busca de novas estratégias terapêuticas para doenças que envolvam o tecido nervoso.

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Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
FONSECA, Erika Toledo da. Identificação de áreas neurogênicas no sistema nervoso central de cobaias (Cavia porcellus, Linnaeus 1758): cultura, caracterização e diferenciação de precursores neurais. 2012. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.