Clonagem, Expressão e Purificação de Tiorredoxinas Peroxidases em Sistemas Bacterianos.

• Processo: 08/09132-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marcos Antonio de Oliveira
• Beneficiário: Carlos Abrunhosa Tairum Junior
• Instituição Sede: Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus Experimental do Litoral Paulista. São Vicente , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/50930-3 - Análise funcional e estrutural de proteínas antioxidantes dependentes de tióis: uma investigação de mecanismos moleculares de catálise e da formação de complexos protéicos contendo dissulfetos mistos, AP.JP
• Assunto(s): Expressão de proteínas Espécies de oxigênio reativas Biologia estrutural Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: espécies reativas de oxigênio | Expressão de proteínas | Saccharomyces cerevisiae | Tiorredoxinas Peroxidases | Biologia Molecular Estrutural

Resumo

Tiorredoxinas peroxidases (TPx) são proteínas capazes de decompor H2O2, peróxidos orgânicos e peroxinitritos, utilizando cisteínas altamente reativas. Trabalhos recentes também apontam grande importância destas proteínas em eventos de sinalização celular e sob determinadas condições as TPx apresentam forte oligomerização, o que lhes confere a função de chaperona. A maioria das TPxs utiliza tiorredoxina (Trx) como redutor. NADPH, por sua vez, reduz Trx em reação catalisada por tiorredoxina redutase (Trr). Todas as transferências de equivalentes redutores entre as proteínas deste sistema são efetuadas através de cisteínas reativas e a substituição Cys ®Ser leva a formação de complexos estáveis unidos por dissulfetos mistos. A expressão destas proteínas em grandes quantidades em sistemas bacterianos pode permitir sua cristalização, como também a de complexos unidos por dissulfetos mistos, e um estudo refinado de suas relações moleculares através da determinação das estruturas 3D pela metodologia da cristalografia de raios X.