Geração e caracterizaçao de anticorpos policlonais em coelhos

• Processo: 11/03166-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Roy Edward Larson
• Beneficiário: Gabriel Sarti Lopes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/19108-8 - Caracterização de proteínas RNA-ligantes nos terminais pré-sinápticos de neurônios de lula (Loligo), AP.R
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Purificação de proteínas Anticorpos policlonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpos policlonais | proteina RNA ligante | Proteinas recombinantes | Purificação de Proteínas | expressão heteróloga de antígenos

Resumo

Isolar antígenos e preparar-los para inoculação. a) Expresso em bactéria. A clonagem de fragmentos e/ou seqüencias que representam a proteína completa pode permitir sua expressão em bactéria e purificação, e portanto, ser usado como antígeno.b) Peptídeo sintético. A tradução de seqüencias de nucleotídeos pode ser a base de definir um peptídeo sintético como antígeno.Inocular coelhos e remover amostras de sangue para testes. Sangrar o coelho, preparar soro e purificar IgG por FPLC em coluna de HiTrap proteína A ou G.Verificar o titre e especificidade de anticorpo no soro por western blot.Verificar a imunoreatividade para imunoprecipitação.Verificar a imunoreatividade para imunofluorescence em fatias de tecido.Aplicar o metodologia para vários antígenos identificados no projeto.