Expressão e caracterização de duas proteínas de superfície de Leptospira interrogans

• Processo: 11/08930-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Renan Francisco Domingos
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Leptospira interrogans Leptospirose Genomas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Genômica Funcional | Leptospira interrogans | Biotecnologia

Resumo

A leptospirose é uma zoonose de importância global que nos últimos anos vem sendo considerada uma das principais doenças infecciosa emergentes. A distribuição geográfica da doença é principalmente cosmopolita estando associada à baixa qualidade de vida da população. No Brasil, como em outros países em desenvolvimento, a maioria das infecções ocorre através do contato com águas contaminadas por urina de ratos (principais reservatórios da doença). Nesses países, a ineficácia ou inexistência de infra-estrutura e saneamento básico adequado são condições favoráveis às epidemias. Para impedir a expansão e controlar a doença são necessários não só a "implementação" das formas "convencionais" de controle, mas também o desenvolvimento de novas estratégias. Atualmente, acredita-se que o desenvolvimento de uma vacina efetiva e com mínimos efeitos adversos seja uma estratégia importante para complementar as formas de prevenção e controle da doença. Neste sentido, vários estudos têm sido conduzidos visando identificar e caracterizar antígenos relevantes envolvidos no processo de interação patógeno-hospedeiro. Neste sentido, o projeto propõe identificar no genoma de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, clonar e caracterizar 2 proteínas (LIC11834 e LIC12253). Estes genes serão amplificados a partir do DNA genômico de L. interrogans, e os insertos de DNA clonados em vetores apropriados utilizando E. coli como sistema hospedeiro de expressão. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal, analisadas quanto a sua estrutura pela técnica de dicroísmo circular e a imunogenicidade avaliada em soros de camundongos imunizados com as proteínas por ELISA e/ou Western blotting. Será estudada a ligação das proteínas recombinantes obtidas com componentes da matriz extracelular; com componentes do sistema complemento humano, como o fator H, com plasminogênio, e fibrinogênio a fim de avaliarmos o envolvimento dessas proteínas no processo de adesão e patogenicidade de L. interrogans. A atividade de imunoproteção em modelo animal também será analisada para sabermos se estas proteínas são interessantes para comporem uma nova vacina contra leptospirose. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

DOMINGOS, Renan Francisco. Caracterização de duas proteínas de Leptospira interrogans na patogênese da leptospirose.. 2014. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.